Nrf2激活劑(NK-252)

Nrf2激活劑(NK-252)公司正在出售的產(chǎn)品：FAK/FITC 熒光標(biāo)記粘著斑激抗體2'-脫氧胸苷-5'-三三 dTTP,100 mM 溶液, pH 7.0
FAK2/Pyk2/FITC 熒光標(biāo)記富含脯氨的酪氨激2抗體IgG2′-脫氧胞苷-5′-二鈉鹽 98%
phospho-Pyk2 (Tyr402)/FITC 熒光標(biāo)記化富含脯氨的酪氨激2抗體IgG鳥(niǎo)苷-5′-三鈉鹽(GTP) ≥9

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
薄層菌人腫瘤壞死因子βAnti-OR10AD1 Antibody人骨成型蛋白2(BMP-2)

維氏紅色球菌小鼠乙型肝炎表面抗原Anti-OR10A6 Antibody人骨成型蛋白2(BMP-2)

溜曲霉大鼠白介2受體Anti-OR10A7 Antibody人(cAMP)

猴頭人可溶性EndoglinAnti-OR10AG1 Antibody人(cAMP)

卷枝毛霉詹森變型人腫瘤壞死因子αAnti-OR10AD1 Antibody人甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲蛋白(MASP)

毛木耳大鼠腎上腺髓質(zhì)Anti-OR10AG1 Antibody人甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲蛋白(MASP)

枯草芽胞桿菌人腫瘤壞死因子可溶性受體ⅡAnti-OR10C1 Antibody人周期依賴性激7(CDK-7)

大腸埃希氏菌定量標(biāo)準(zhǔn)菌株大鼠β內(nèi)啡肽受體Anti-OR10D4P Antibody人周期依賴性激7(CDK-7)

枯草芽孢桿菌小鼠活化蛋白CAnti-OR10C1 Antibody人周期依賴性激2(CDK-2)

異常漢遜酵母小鼠α葡萄糖苷Anti-OR10G2 Antibody人周期依賴性激2(CDK-2)

綿羊肺炎支原體人腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠAnti-OR10D4P Antibody人周期依賴性激1(CDK-1)

印度洋細(xì)小棒狀菌大鼠鈣/鈣調(diào)依賴性蛋白激2Anti-OR10G6 Antibody人周期依賴性激1(CDK-1)

芽孢桿菌小鼠Anti-OR10G4 Antibody人磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)

綠粘帚霉人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1Anti-OR10G2 Antibody人磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)

黏膜乳桿菌大鼠肝脂Anti-OR10G7 Antibody人乳脫氫(LDH)

枯草芽孢桿菌人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子αAnti-OR10H1 Antibody人乳脫氫(LDH)

G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB6A抗體蛹草1號(hào)人骨肉瘤細(xì)胞

復(fù)制激活因子C2抗體#褐色諾氏菌人甲狀腺癌細(xì)胞

酯抑制劑8抗體肝色牛排菌人食管鱗癌細(xì)胞

神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白1抗體大杯香菇人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞
Nrf2激活劑(NK-252)臭曲霉 鉬酸鈉

南白冬胞酵母 香蘭

廣布靈芝 藜蘆

大腸埃希 對(duì)苯二甲

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 鄰苯二甲

大腸埃希 4-甲

短小桿屬 3-甲

分枝節(jié)桿 2-甲

球孢白僵 對(duì)羥基苯甲

大孢鏈格孢 3-羥基苯甲

Zhihengliuella 2，4-二甲氧基苯甲

假絲酵母屬 試劑

Ag-12（蘑菇） 原兒茶

漿孢毛霉 3，4-二苯甲

青春雙歧桿 聚乙烯縮丁