Nek2/Hec1抑制劑(INH6)

Nek2/Hec1抑制劑(INH6)公司*的產(chǎn)品：Anti-NEP/FITC 熒光素標記腦啡肽酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗體 Anti-ANGPTL

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Nek2/Hec1抑制劑(INH6)

英文名稱：INH6

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA Kit英文名稱：VLDLR ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域5抗體包裝1g

極低密度脂蛋白(VLDL)ELISA Kit英文名稱：VLDL ELISA Kit腦鈉通道蛋白2抗體包裝25g

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基質(zhì)細胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)ELISA Kit英文名稱：SDF-1α/SDF1A ELISA Kit小腸鈉通道蛋白5抗體包裝100g

基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA Kit英文名稱：SDF-1a/CXCL12 ELISA KitAPXL蛋白抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)ELISA Kit英文名稱：TIMP-4 ELISA Kit敏感離子通道蛋白3抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)ELISA Kit英文名稱：TIMP-3 ELISA Kit天門冬β羥化抗體包裝1g

基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)ELISA Kit英文名稱：TIMP-2 ELISA Kit精加壓受體2抗體包裝250mg

基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)ELISA Kit英文名稱：TIMP-1 ELISA Kit骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體包裝5g

基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA Kit英文名稱：MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit膜粘連蛋白8抗體包裝100g

基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA Kit英文名稱：MMP-9 ELISA Kit通道蛋白8抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒細胞膠原(MMP-8)ELISA Kit英文名稱：MMP-8 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝500g

基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)ELISA Kit英文名稱：MMP-7 ELISA Kit凋亡抑制因子5抗體包裝100g

基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)ELISA Kit英文名稱：MMP-5 ELISA Kit通道蛋白-3抗體包裝25g

基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)ELISA Kit英文名稱：MMP-4 ELISA Kit載脂蛋白D抗體包裝1g

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