商品介紹:
Bergaptol是CYP3A4酶脫芐基作用的抑制劑,它的IC50是24.92uM.近的研究表明它有抗增殖和抗癌性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):486-60-2 別名:5-Hydroxypsoralen;4-Hydroxybergapten 純度:99.28% 分子量:202.16 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CYP3A4酶脫芐基抑制劑(Bergaptol)
英文名稱:Bergaptol
產(chǎn)品規(guī)格:500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
澳型核果褐腐病菌Bacillus sp.兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
釀酒酵母Bacillus sp.兔子α2抗纖溶(α2-AP)
玫瑰色紅球菌Aeromonas sp.兔子α2抗纖溶(α2-AP)
構(gòu)巢曲霉Halobacillus sp.兔子纖溶原(Plg)
米曲霉Halobacillus sp.兔子纖溶原(Plg)
鐵銹灰鏈霉菌Aeromonas sp.兔骨形成蛋白(BMPs)
菊異莖點(diǎn)霉Micrococcus sp.兔骨形成蛋白(BMPs)
沼澤考克氏菌Aeromonas sp.兔骨保護(hù)(OPG)
海斯頓氏菌Aeromonas sp.兔骨保護(hù)(OPG)
蘇云金芽孢桿菌Micrococcus sp.兔胰淀(Amylin)
蠟狀芽孢桿菌Micrococcus sp.兔胰淀(Amylin)
聚集二疊紀(jì)桿菌Sphingobacterium sp.兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
毛栓孔菌Proteus sp.兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)
桑黃Thermus sp.兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
香腸乳桿菌Curtobacterium sp.兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
繩狀籃狀菌Curtobacterium sp.兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)
Toll樣受體1抗體土芽孢桿菌毛殼菌屬
DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體還原鉻亮桿菌存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)\
三葉肽因子2抗體蒙氏假單胞菌葡萄穗霉屬菌
辣椒受體抗體弗氏紅球菌漆斑菌屬菌
CYP3A4酶脫芐基抑制劑(Bergaptol)大腸埃希 可溶性淀粉
葡萄座腔 馬鈴薯浸出粉
產(chǎn)黃青霉 馬鈴薯淀粉
矩圓黑盤(pán)孢 直鏈淀粉
浙農(nóng)1號(hào) 支鏈淀粉
柞蠶鏈球 支鏈淀粉
米曲霉 葡萄糖異構(gòu)化
鐘器腐霉 漆
總狀共頭霉 尿激
枯草芽孢桿 堿性磷酸
釀酒酵母 堿性磷酸
金針菇 超氧化物歧化
南方靈芝 尿(巨豆)
空腸彎曲桿 α-葡萄糖苷
綠色木霉 葡萄糖氧化