phosphodiesterase抑制劑(R 80123)

產(chǎn)品屬性：
中文名稱：phosphodiesterase抑制劑(R 80123)
英文名稱：R 80123
產(chǎn)品規(guī)格：1mg
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
R80123是R79595的Z異構(gòu)體，也是一個(gè)高的選則性的phosphodiesterase的抑制劑，他的作用和(HY-100615,Revizinone)R80122相似。
注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：phosphodiesterase抑制劑(R 80123)

英文名稱：R 80123

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

蒼耳子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： dCDP, 2'-Deoxycytidine-5'-Diphosphate,3sodium saltFAM36A蛋白抗體包裝10MG

蒼術(shù)(茅蒼術(shù))（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DMPFAM50A蛋白抗體包裝100g

蒼術(shù)苷A英文名稱： Dodecyl gallateFAM134C蛋白抗體包裝25g

蒼術(shù)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： dUMP, 2'-Deoxyuridine-5'-monophosphate, disodium salt凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體包裝5g

藏菖蒲（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Indoxyl-Glucoside乙型肝炎病X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體包裝25g

藏紅花英文名稱： Lanthanum(III) oxide卵泡抑相關(guān)蛋白5抗體包裝5g

藏木香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Magnesium chloride, hexahydrate叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子C2抗體包裝100g

草果（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Manganese (II) acetate, tetrahydrateFbx15蛋白抗體包裝25g

草烏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Neuraminidase from Clostridium perfringensFRMD2蛋白抗體包裝5g

草玉梅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nickel (II) acetate, tetrahydrateFAM98B蛋白抗體包裝100ml

草質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nile redFAM50C蛋白抗體包裝25ml

草質(zhì)苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-PhenylureaFAM91A1蛋白抗體包裝1g

側(cè)柏葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Okadaic acid, free acidFRMD1蛋白抗體包裝5g

梣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Okadaic acid, sodium salt髓鞘缺陷相關(guān)蛋白抗體包裝25MG

茶黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium carbonate, hydrate叉頭蛋白B1+B2抗體包裝1g

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格：>99%食欲/阿立新B試劑盒去氧紫草;Deoxyshikonin

地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR生長(zhǎng)抑試劑盒千金子二萜二乙酰酰酯;Euphor

環(huán)帶擬盤多毛孢Pestalotiopsis│zonata 質(zhì)量規(guī)格：>97%生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin試劑盒20-去氧巨大戟萜;20-deoxyi
phosphodiesterase抑制劑(R 80123)性成纖維生長(zhǎng)因子（多肽抗原）吉它霉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

血管緊張轉(zhuǎn)換2抗原己內(nèi)酰（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

腦鈉（多肽抗原）加巴噴?。?biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

生物化腦鈉多肽加替沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

過(guò)敏C5（補(bǔ)體C5）抗原蝶呤（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

卵巢癌抗原蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat

Caspase 激活的脫氧核糖核（抗原）磺丁脲(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

肌紅蛋白抗原咪唑Human, Mouse, Rat

鈣調(diào)節(jié)蛋白-1（抗原）咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)