Mps1抑制劑(AZ3146)

Mps1抑制劑(AZ3146)公司*的產(chǎn)品：S-100A1/FITC 熒光標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A1抗體IgG
S100-A8/MRP8/CFAG/FITC 熒光標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A8抗體IgG
S100-A9/MRP14/CFAG/FITC 熒光標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A9抗體IgG
S100A13/FITC 熒光標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgG
Phospho-S6 Ri

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Mps1抑制劑(AZ3146)

英文名稱：AZ3146

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

糙皮側(cè)耳Escherichia coli大鼠磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)

兩形頭曲霉Escherichia coli大鼠組織蛋白K(cath-K)

秦氏蜜環(huán)菌Escherichia coli大鼠組織蛋白K(cath-K)

根瘤菌Escherichia coli大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Escherichia coli大鼠巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

威爾氏李斯特菌Escherichia coli大鼠骨形成蛋白(BMPs)

大腸埃希菌Escherichia coli大鼠骨形成蛋白(BMPs)

枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

香菇Escherichia hermannii大鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

三孢布霉Escherichia coli大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

白地霉Escherichia hermannii大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

副豬嗜血桿菌Escherichia sp.大鼠戊糖(Pentosidine)

褐紅小孔菌Escherichia sp.大鼠戊糖(Pentosidine)

蘇云金芽胞桿菌勵(lì)木亞種Escherichia sp.大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)

淡紫擬青霉Escherichia sp.大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)

巴西果小克銀漢霉Escherichia sp.大鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)

核苷磷化抗體尖孢鐮刀菌EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞

早老蛋白1+2抗體布氏正青霉SV40轉(zhuǎn)化的洲綠猴腎細(xì)胞

磷化絲/蘇抗體芽枝霉菌人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞

端粒抑制因子PinX-1抗體克羅德巴酵母人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞
Mps1抑制劑(AZ3146)核桃黃毛桿* 葡聚糖T6

紅球 葡聚糖T5

玫瑰產(chǎn)色鏈霉 快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂

靈芝屬 葡聚糖T4

嗜熱毀絲霉 葡聚糖T3

廣食黃桿 甘培養(yǎng)基

枯草芽孢桿 烯葡聚糖凝膠S-500 HR

平臍蠕孢 烯葡聚糖凝膠S-400 HR

植物乳桿 烯葡聚糖凝膠S-300 HR

細(xì)小棒桿 烯葡聚糖凝膠S-200 HR

白僵 TTC瓊脂基礎(chǔ)

蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 DEAE瓊脂糖凝膠CL-6B

球孢白僵 羥甲基瓊脂糖凝膠FF

青枯假單孢桿 瓊脂糖凝膠2B

桑樹腸桿 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)