鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制劑(SK1-IN-1)

鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制劑(SK1-IN-1)公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-Nur77 (Ser351) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-Rabbit IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
E

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制劑(SK1-IN-1)

英文名稱(chēng)：SK1-IN-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

匍枝根霉原變種Bacillus cereus

多主葡萄殼菌Bacillus cereus

黑曲霉Bacillus cereus

分散泛菌（可訂）Bacillus cereus

三鏈霉菌Bacillus cereus

灰綠曲霉Bacillus cereus

玉蜀黍尾孢菌*Bacillus cereus

大腸埃希菌Bacillus cereus

半園田頭菇Bacillus cereus

產(chǎn)氮假單胞菌Bacillus cereus

無(wú)Bacillus cereus

紅球菌Bacillus cereus

西藏嗜鹽堿紅菌Bacillus thuringiensis

蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Bacillus cereus

青紫黑鏈霉菌Bacillus cereus

謝瓦曲霉Bacillus cereus

豬瘟抗體(IgM)免疫試劑盒三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白F亞基3抗體人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362) 比枯枯靈

豬瘟抗體(IgG)免疫試劑盒三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A亞基5抗體人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362) 蓽茇酰

豬胃泌調(diào)節(jié)(OXM)免疫試劑盒ADCK1蛋白抗體人可溶性粘附分子(Sam) 蓖麻

豬偽狂犬病(PRV)抗體(IgG)免疫試劑盒?；Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體人可溶性粘附分子(Sam) 蝙蝠葛堿
鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制劑(SK1-IN-1)SCN1B 英文名稱(chēng)： 鈉離子通道β1抗體 0.1ml

ER-Alpha 英文名稱(chēng)： 雌激素受體α抗體(用于western blot) 0.1ml

Spindlin 1/SPIN-2 形成相關(guān)基因抗體 Anti-Spindlin 1/SPIN-2 0.2ml

Anti-Thymosin Alpha-1/FITC 熒光素標(biāo)記胸腺肽 α-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4(Ser941) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml

ATF3 (Activating Transcription Factor3) 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)