JAK3抑制劑(WHI-P154)

JAK3抑制劑(WHI-P154)公司正在出售的產(chǎn)品：SCN2A/FITC 熒光標(biāo)記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關(guān)蛋白抗體IgG
SCN9A/NAV1.7/FITC 熒光標(biāo)記電壓開啟的鈉離子通道SCN9AIgG
SCP2/NLTP/FITC 熒光標(biāo)記固攜帶蛋白2抗體IgG
SCP3/FITC 熒光標(biāo)記聯(lián)會復(fù)合體蛋白3抗體IgG
Secretin/FITC 熒光標(biāo)記分泌抗體IgG
Sec

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
青色鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)

淡紫灰吸水鏈霉菌Rhizobium galegae大鼠淋巴因子

釀酒酵母Rhizobium galegae大鼠淋巴因子

Rhizobium galegae大鼠N-乙?；?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)

葡萄牙棒孢酵母Rhizobium galegae大鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)

假單胞菌屬Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)

栗酒裂殖酵母Rhizobium galegae大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)

藤黃微球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)

乳片球菌Rhizobium galegae大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)

阿納托亞正青霉Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)

核盤菌Rhizobium galegae大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)

平菇Rhizobium galegae大鼠Smad1  

腐皮鐮孢菌Rhizobium galegae大鼠Smad1  

枯草芽孢桿菌Rhizobium galegae大鼠Smad7  

油鑒別試劑 Rhizobium galegae大鼠Smad7  

球毛殼Rhizobium galegae大鼠26S蛋白體(26S PSM)

泛連接抗體墨西哥劍菌人體胚胎干細胞

多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體薄皮干酪菌人神經(jīng)干細胞

神經(jīng)叢蛋白B2抗體黃傘視網(wǎng)膜Muller干細胞

血小板源性生長因子A抗體白囊耙齒菌小鼠胚胎干細胞EDJ#22（干細胞庫保藏）
JAK3抑制劑(WHI-P154)平菇(99) 種培養(yǎng)基

貪噬屬 瓊脂糖Ⅲ

核果鏈核盤 孟加紅培養(yǎng)基（虎紅培養(yǎng)基）

大腸埃希 玉米粉瓊脂

海南擬盤多毛孢 高鹽察氏瓊脂

腐皮鐮孢 瓊脂糖3：1HRB

枯草芽孢桿 馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）（新藥典）

松口蘑 2-烯酰氨基-2-甲基-1-磺酸

硬結(jié)節(jié)桿 小鼠分離液

芽孢桿 大鼠分離液

枯草芽孢桿 羥基纖維

黑細基格孢 腸道計數(shù)瓊脂（VRBDA）

釀酒酵母 羥基纖維

尖孢隔指孢 羥基纖維

黑烏霉 羥基纖維