變構(gòu)型Akt抑制劑(ARQ-092)

變構(gòu)型Akt抑制劑(ARQ-092)公司*的產(chǎn)品：PBK/TOPK/FITC 熒光標(biāo)記PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體IgG地蠟 AR
Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 熒光標(biāo)記化PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體IgG中性樹膠 FMP
Cecropin/FITC 熒光標(biāo)記抗菌肽/天蠶抗體IgG切片石蠟 病理級，熔點(diǎn)52～54℃
CENPA /FITC

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：變構(gòu)型Akt抑制劑(ARQ-092)

英文名稱：ARQ-092

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

匍匐曲霉重組髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白1-125Anti-GRTP1 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)

Rhodobacter  vinaykumarii雙微體2癌基因抗原Anti-GRM8 Antibody人抗腦組織抗體(ABAb)

大腸埃希氏桿菌甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GSDME Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)

污黑腐皮殼三聚與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物Anti-GSDMC Antibody人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)

假單胞菌三聚與牛血清白蛋白偶聯(lián)物Anti-GSK3B Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)

小麥紋枯與牛血清白蛋白偶聯(lián)物Anti-GSPT1 Antibody人抗磷脂酰絲抗體(APSA)

熒光威克酵母髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白(活性多肽)Anti-GSTA1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)

釀酒酵母冰/與牛血清蛋白偶聯(lián)物Anti-GTF2A1 Antibody人抗磷壁抗體(TA)

Shinella kummerowiae Lin et al.辣根過氧化物標(biāo)記三聚Anti-GTF3C2 Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)

無色桿菌屬三聚偶聯(lián)雞卵白蛋白Anti-GTF3A Antibody人抗淋巴抗體(ALA/LCA)

產(chǎn)蝦青鞘鞍單胞菌三聚偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GSTM2 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)

針猴頭三聚偶聯(lián)牛IgGAnti-GTF2H1 Antibody人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)

庫爾勒海洋桿菌甲硝唑偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GTPBP2 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)

外外安德倫茨氏菌三聚與雞卵白蛋白偶聯(lián)物Anti-GTF3C3 Antibody人抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)

巴西果小克銀漢霉神經(jīng)元特異性烯化抗原Anti-GTF3C2 Antibody人抗紅抗體(RBC)

指狀青霉Nogo-66 (1-40)Anti-GTPBP2 Antibody人抗紅抗體(RBC)

鈉離子肌轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體木霉紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK2抗體擬康氏木霉人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系

神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK3抗體木木霉人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK4抗體雅致枝霉黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞
變構(gòu)型Akt抑制劑(ARQ-092)唾液乳桿水楊亞種 1,3,5-三溴苯

藤倉鐮孢 4-甲氧基偶氮苯

大隱球酵母 1,4-二甲氧基苯

蘇云金芽孢桿 2,2-二羥基聯(lián)苯

澳型核果褐腐病 暈苯

谷棒狀桿 4-溴聯(lián)苯

*肉葡萄球 4-溴苯

康寧木霉 溴化鈉

中國蜜環(huán) 鈉

黑曲霉 甘油磷酸鈣

哈氏弧 次亞磷酸鈣

纖維化纖維微細(xì) 

樟疫霉 十八冠-6

解脂亞羅酵母 安息香乙

多形布勒擔(dān)子酵母 安息香 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)