p38α抑制劑

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p38α抑制劑

英文名稱：R1487 Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

微球菌Rarobacter sp.兔阿霉(ADR)

威爾酵母Rarobacter sp.兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)

枯草芽孢桿菌Microbacterium sp.兔基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)

深海微小桿菌Budvicia aquatica兔抑瘤M(OSM)

香菇Rarobacter sp.兔抑瘤M(OSM)

屎腸球菌Rarobacter sp.兔血管生成2(ANG-2)

小孢根霉原變種Rarobacter sp.兔血管生成2(ANG-2)

思爾娃假絲酵母Rarobacter sp.兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)

斐萊氏溫?fù)P球蟲Rarobacter sp.兔血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)

小青霉Deinococcus sp.兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)

香菇Aureobacterium sp.兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)

澳型核果褐腐病菌Sporolactobacillus sp.兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

煙曲霉Paenibacillus sp.兔6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)

溜曲霉Sphaerobacter sp.兔血栓B2(TXB2)

沃氏富鹽菌Kurthia zopfii兔血栓B2(TXB2)

尖孢鐮孢Kurthia sp.兔血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)

TarDNA結(jié)合蛋白43抗體泗陽鞘鞍桿菌嗜鹽鏈單孢菌

轉(zhuǎn)移生長因子β3抗體TGFβ3阿氏腸桿菌絲衣霉屬

腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體球形節(jié)桿菌穗霉屬

生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體新型隱球酵母（新型隱球菌）天藍(lán)褐鏈霉菌
p38α抑制劑哈茨木霉 硫酸軟骨ABC

草生毛霉 硫酸軟骨AC

副球 硫酸軟骨B

釀酒酵母 神經(jīng)(微生物)

黑曲霉 β-淀粉

謝瓦曲霉 酮酸氧化

腸球?qū)?/span> α-淀粉(豬胰腺 )

麗瑪亞霉鮮紅變種 堿性蛋白

黑曲霉 T4 DNA聚合