Rho激酶抑制劑（H-1152 dihydrochloride）

Rho激酶抑制劑（H-1152 dihydrochloride）公司*的產(chǎn)品：Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC 熒光標(biāo)記化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體IgG聚氧烯 average Mv ~2,000,000, powder
Melamine/FITC 熒光標(biāo)記抗三聚抗體IgG聚氧烯 average Mv ~4,000,000, powder
Melamine/

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Rho激酶抑制劑（H-1152 dihydrochloride）

英文名稱：H-1152 dihydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

黑曲霉人血清總膽固Anti-VN1R4 Antibody小鼠白介18(IL-18)

米根霉人金屬硫蛋白2Anti-VPS26B Antibody小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)

蘇云金芽孢桿菌人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1Anti-VRK2 Antibody小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)

蠟樣芽孢桿菌人3-硝基酪Anti-VSNL1 Antibody小鼠粒集落激因子(G-CSF)

枯草芽胞桿菌人糖聚糖Anti-VPS72 Antibody小鼠粒集落激因子(G-CSF)

枯草芽孢桿菌人半胱酰白三烯Anti-VRK3 Antibody小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

膠紅酵母人鈣腔蛋白Anti-VSNL1 Antibody小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

根瘤菌人載脂蛋白A5Anti-VTI1A Antibody小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)

黃硬皮馬勃人維生D結(jié)合蛋白Anti-VTI1A Antibody小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)

尖孢鐮刀菌人硒蛋白1Anti-VWA5A Antibody小鼠白介10(IL-10)

Oleispira antarctica人血清淀粉樣蛋白A3Anti-WASF2 Antibody小鼠白介10(IL-10)

土星漢遜酵母人鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白4Anti-WASF2 Antibody小鼠白介11(IL-11)

注水肉檢測(cè)試紙 人色b561Anti-WDHD1 Antibody小鼠白介11(IL-11)

大腸埃希菌人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2Anti-WASF4 Antibody小鼠白介15(IL-15)

赤霉菌人脂肪型脂肪結(jié)合蛋白Anti-WASF3 Antibody小鼠白介15(IL-15)

相思根瘤菌人磷脂酰肌蛋白聚糖3Anti-WDR61 Antibody小鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)

囊泡谷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體雷氏青霉人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞

神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體神經(jīng)鈣蛋白根柄白蟻傘小鼠肺成纖維細(xì)胞

維生D3受體抗體茄腐鐮刀菌（斜面）草地夜蛾卵巢細(xì)胞

囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體土黃小脆柄菇抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系
Rho激酶抑制劑（H-1152 dihydrochloride）大腸埃希氏 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-鈉鹽

秀珍菇 羅漢松樹(shù)脂

裂褶 鄰聯(lián)甲苯

大腸埃希氏 定堿

尖鐮孢古巴專化型 達(dá)旦黃

黑曲霉 蘿卜硫

根瘤 2-萘磺酸鈉

植物乳桿 羅丹明B

粉紅單端孢霉 半二甲橙

繩狀籃狀 六氫吡啶羧酸

太湖新鞘氨 硫酸奎寧

 Bacillus  硫酸奎寧一水物

 酸性藍(lán)1

簡(jiǎn)單芽孢桿 雷帕霉

地衣芽胞桿 4-（2-吡啶偶氮）間苯二鈉鹽