商品介紹:
NCT-501是一種茶堿類的有效醛脫氫酶1A1(ALDH1A1)選擇性抑制劑,抑制hALDH1A1時IC50值為40nM,選擇性超過其它ALDH同工酶和其它脫氫酶(作用于hALDH1B1,hALDH3A1,和hALDH2時,IC50值>57UM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1802088-50-1 純度:99.75% 分子量:416.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ALDH1A1抑制劑(NCT-501)
英文名稱:NCT-501
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
核黃氧化德沃斯氏菌Rhizobium galegae大鼠26S蛋白體(26S PSM)
分枝節(jié)桿菌Rhizobium gallicum大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
枯草芽孢桿菌Rhizobium galegae大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)
有柄樹舌靈芝(白芝)(可訂購)Rhizobium giardinii大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
黑木耳Rhizobium huautlense大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
地花Rhizobium hainanense大鼠原激活肽(TAP)
露濕擬漆斑菌Rhizobium leguminosarum大鼠原激活肽(TAP)
嗜糖土地芽孢桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)
密叢毛霉Rhizobium indigoferae大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)
醬油曲霉Rhizobium leguminosarum大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)
果生核盤菌Rhizobium leguminosarum大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)
硬結(jié)節(jié)桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)
蛇孢霉屬Rhizobium leguminosarum大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)
發(fā)酵畢赤酵母Rhizobium leguminosarum大鼠胃蛋白(PP)
冬蟲夏草Rhizobium leguminosarum大鼠胃蛋白(PP)
*林肯鏈霉菌Rhizobium leguminosarum大鼠(HYD)
磷酯Cβ3水粉杯傘小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)OSKMZ-1(干細(xì)胞庫保藏)
磷乙胺轉(zhuǎn)移A抗體輪枝孢屬小鼠胚胎干細(xì)胞RW.4(干細(xì)胞庫保藏)
足細(xì)胞表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體草莖點霉小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2(干細(xì)胞庫保藏)
孕激受體抗體立枯絲核菌小鼠胚胎干細(xì)胞CE3(干細(xì)胞庫保藏)
ALDH1A1抑制劑(NCT-501)Citreicella aestuarii 羥基纖維
林生鬼傘 羥基纖維
茄鏈格孢 品紅亞硫酸鈉瓊脂
Vibrio quintilis 羥基纖維
Corallococcus sp. 15-羥基松香酸
淺紫灰鏈霉淺紫灰亞種 纖維
近似臘蘑 纖維
蓋氏海桿狀 纖維
枯草芽孢桿 熬和樹脂
耐冷冷桿 732陽離子交換樹脂
紡錘狀鏈霉 Amberlite XAD7HP離子交換大孔吸附樹脂
釀酒酵母 金合歡
玉米大斑病 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液
竹瘤座 大黃-8-O-葡萄糖苷
釀酒酵母 Amberlite XAD4離子交換大孔吸附樹脂