商品介紹:
KRIBB11是HSF的抑制劑,IC50值為1.2μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):342639-96-7 純度:99.04% 分子量:284.27 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HSF抑制劑(KRIBB11) | KRIBB11 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
動(dòng)球菌大鼠淋巴因子Anti-OR52B2 Antibody人蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)
毛霉屬人肝生長(zhǎng)因子Anti-OR52D1 Antibody人蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)
變異鏈球菌小鼠巨噬集落激因子Anti-OR52A5 Antibody人山梨脫氫(SDH)
多形布勒擔(dān)子酵母大鼠微量蛋白Anti-OR52B2 Antibody人山梨脫氫(SDH)
香菇小鼠巨噬來(lái)源的趨化因子Anti-OR52D1 Antibody人肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)(PPI)
溶淀粉類(lèi)芽孢桿菌人粒巨噬集落激因子Anti-OR52E1 Antibody人肽基脯酰順?lè)串悩?gòu)(PPI)
紫黑杜搟氏菌大鼠N-乙?;?絲酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)酰-脯Anti-OR52E1 Antibody人鳥(niǎo)酰轉(zhuǎn)移(OCT)
緋紅密孔小鼠正常T表達(dá)和分泌因子Anti-OR52E2 Antibody人鳥(niǎo)酰轉(zhuǎn)移(OCT)
爪哇根霉人膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Anti-OR52E4 Antibody人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)
謝瓦氏曲霉大鼠抗血小板抗體IgG/M/AAnti-OR52E2 Antibody人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)
白僵菌大鼠Ⅰ型膠原N末端肽Anti-OR52E6 Antibody人蛋白磷(PP)
玫瑰庫(kù)克氏菌人粒集落激因子Anti-OR52N1 Antibody人蛋白磷(PP)
葉居菌小鼠巨噬炎性蛋白2Anti-OR52K1 Antibody人硫氧還蛋白還原(TrxR)
茶褐針層孔菌大鼠熱休克蛋白27Anti-OR52E5 Antibody人硫氧還蛋白還原(TrxR)
豕鏈球菌小鼠催產(chǎn)Anti-OR52E6 Antibody人白彈性蛋白(HLE)
擬卵蓋鵝膏菌趨化蛋白2Anti-OR52N4 Antibody人白彈性蛋白(HLE)
抵抗樣分子α抗體枯斑擬盤(pán)多毛孢人口腔表皮樣癌細(xì)胞
RAM-11抗體腐皮鐮孢菌小鼠畸胎瘤細(xì)胞
環(huán)指蛋白126抗體相思根瘤菌人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞
mRNA結(jié)合蛋白抗體姬松茸大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
HSF抑制劑(KRIBB11)南方散斑殼 22-Dehydroclerosterol
銅綠假單胞(綠膿桿) 1,2-O-異亞基-beta-D-吡喃果糖
蟬花8-2 杜鵑
葡枝根霉 鴨嘴花堿
釀酒酵母 高根二
枯草芽孢桿 p-Coumaryl alcohol
釀酒酵母 2,4,6-氧基苯乙酮
膠孢 桉油烯
釀酒酵母 櫻花亭
蠟狀芽孢桿蕈狀變種 球松
大腸埃希 Kaempferol 3,7,4'-trimethyl ethe
地星 二
鏈孢囊 紫鉚因
黃傘 香橙,香樹(shù)
煙熏色鏈霉 2-Ethyl-2,6,6-trimethylpiperidin