Smoothened抑制劑(BMS-833923)

Smoothened抑制劑(BMS-833923)公司正在出售的產(chǎn)品：MITF/FITC 熒光標(biāo)記小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG4-氨三氟苯 98%
Mitofilin/IMMT /FITC 熒光標(biāo)記線粒體內(nèi)膜蛋白抗體IgG2,4-二羥苯 98%
MK(Midkine) 熒光標(biāo)記中期因子/肝結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體IgG1-羥-苯并-三氮唑(無(wú)水) 99%
MEK6/FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母人脂肪分化相關(guān)蛋白Anti-ZC3H13 Antibody小鼠磷脂酰絲(PS)

蠟狀芽孢桿菌人鈣調(diào)結(jié)合蛋白Anti-ZC3H4 Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)

香菇人鈣調(diào)磷Anti-ZC3H7B Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)

沼澤黏液桿菌人骨退化特異標(biāo)志物Anti-ZC3H8 Antibody小鼠β-防御(β-DF)

淺灰白鏈霉菌人鈣結(jié)合蛋白Anti-ZCCHC17 Antibody小鼠β-防御(β-DF)

木壘中間根瘤菌人骨形成蛋白6Anti-ZDHHC15 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

蓮座革菌人脂肪結(jié)合蛋白Anti-ZDHHC2 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

根瘤菌人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1Anti-ZC3HC1 Antibody小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)

枯草芽孢桿菌人胰高血糖樣肽1Anti-ZCCHC17 Antibody小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)

沙雷氏菌屬軟骨糖蛋白39(人)Anti-ZDHHC2 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)

米根霉人羥脯糖蛋白Anti-ZDHHC7 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)

*黃溶鏈霉菌人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Anti-ZFP36L1 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

釀酒酵母人低密度脂蛋白Anti-ZDHHC23 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

松口蘑人花生四烯Anti-ZFHX3 Antibody小鼠IgG

灰紅鏈霉菌人骨涎蛋白Anti-ZFYVE19 Antibody小鼠IgG

金龜子綠僵菌人骨堿性磷Anti-ZFP36L2 Antibody小鼠IgM

轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體小孢擬盤(pán)多毛孢人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白3抗體白刺馬勃人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞

腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體逢希伯-林道氏病腸桿菌人胚腎細(xì)胞（亞系克）

抑制蛋白Viperin抗體藍(lán)微褐鏈霉菌人葡萄膜黑色細(xì)胞
Smoothened抑制劑(BMS-833923)盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 咖啡酸乙酯

小鱒魚(yú)大洋芽孢桿 丹磺酰

產(chǎn)色鏈霉 杠柳苷

樹(shù)脂青霉 固紫B

粉狀米勒酵母 假荊芥屬苷

植物乳桿 姜黃

ATCC 43071 京尼平龍膽雙糖苷

枯草芽孢桿 雙硫腙

薛氏酵母 堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽

頂孢霉 亞硝基紅鹽

氈狀金孢霉 8-甲氧基異歐前胡內(nèi)酯

大腸埃希氏 英鈉克鹽

異配囊接霉 鹽酸付玫瑰苯

枯草芽孢桿 甲基麥冬黃烷酮B

木耳 酸