公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HIF-PH抑制劑(Vadadustat)
英文名稱(chēng):Vadadustat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Vadadustat是一種新型的可滴定缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰羥化酶(HIF-PH)抑制劑,目前開(kāi)發(fā)用于治療貧血。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1000025-07-9 別名:PG-1016548;AKB-6548 純度:98.02% 分子量:306.7 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
比卡魯英文名稱(chēng): Atenolol結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1抗體包裝10g
吡非尼,非尼英文名稱(chēng): Atorvastatin calcium生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體包裝50g
吡美莫司;匹美莫司英文名稱(chēng): Atorvastatin calcium富含亮軟骨蛋白抗體包裝1g
達(dá)卡巴英文名稱(chēng): Azacitidine (5-Azacytidine)軟骨蛋白樣蛋白抗體包裝25g
達(dá)沙替尼(無(wú))英文名稱(chēng): Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體包裝5g
達(dá)沙替尼一合物英文名稱(chēng): Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD10抗體包裝100g
地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷英文名稱(chēng): Azelastine HCl卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD7抗體包裝25g
多韋替尼乳鹽英文名稱(chēng): Azelastine HClATP依賴(lài)的解旋CHD1抗體包裝5g
多烯紫杉三合物英文名稱(chēng): Azithromycin染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白抗體包裝100g
多烯紫杉無(wú)/多西他賽英文名稱(chēng): Azithromycin染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
二磺拉帕替尼英文名稱(chēng): Aztreonam染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
二氫卟吩e6英文名稱(chēng): Aztreonam染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白Mi2β抗體包裝1g
凡德他尼英文名稱(chēng): Baccatin IIIATP依賴(lài)的解旋CHD6抗體包裝5g
反鉑英文名稱(chēng): Baccatin IIIATP依賴(lài)的解旋CHD7抗體包裝1g
達(dá)拉賓英文名稱(chēng): BaclofenATP依賴(lài)的解旋CHD8抗體包裝25g
: A208資源名稱(chēng): 淺紫灰鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR胰島抗體試劑盒楊梅苷;Myricitrin
易變鏈霉菌Streptomyces│mutabilis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島自身抗體試劑盒*泊苷;Etoposide
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)≥1300U/MG,BR胰島原試劑盒煙酰;Nicotinamide
HIF-PH抑制劑(Vadadustat)微管卷曲蛋白SYNC抗體 BENZALDEHYDE(SG)Human
磷化SH2結(jié)構(gòu)含磷肌SHIP1抗體補(bǔ)骨脂黃 A BAVACHININ A(SH)Human, Mouse, Rat
磷化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體補(bǔ)骨脂黃 A BAVACHININ A(P)(PLEASE CALL)Human
線(xiàn)粒體促凋亡蛋白抗體磷硫 BENFOTIAMINE(P)Human, Mouse, Rat
墨蝶蛉還原抗體磷硫 BENFOTIAMINE(P)Human, Mouse, Rat
核突觸蛋白α+β抗體4,7-二-1,10-菲咯啉 BATHOPHENANTHROLINE(P)Human
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白2抗體浴銅靈 BATHOCUPROINE(RG)Human, Mouse
絲消旋浴銅靈 BATHOCUPROINE(RG)Human, Rat
鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(SH)Human, Mouse