商品介紹:
Dolutegravir鈉鹽是HIV蛋白酶強(qiáng)效抑制劑,IC50值為2.7nM,對Raltegravir耐藥突變型HIV毒株Y143R,Q148K,N155H,和G140S/Q148H也有一定的抑制作用。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1051375-19-9 別名:GSK-1349572A 純度:97.02% 分子量:441.36 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
補(bǔ)骨脂定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dexmedetomidine HClIQCC蛋白抗體包裝25g
補(bǔ)骨脂二氫黃;補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DeflazacortIQCA1蛋白抗體包裝500g
補(bǔ)骨脂二氫黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(-)-Pantolactone集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體包裝5g
補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Buflomedil HCl干擾alpha 14蛋白抗體包裝100g
補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Buflomedil HCl白介6抗體包裝25g
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Androstene-3,17-dione白介-10抗體包裝5g
布渣葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Androstene-3,17-dione白介6抗體包裝25ml
菜油甾英文名稱: Lucidenic acid A磷化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體包裝5ml
參麥提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vitamin E succinate白介28受體抗體包裝1g
蠶沙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ixabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)KB抑制蛋白激Ζ抗體包裝25g
蒼耳亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-methylcytosine胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
蒼耳子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Ethylcamptothecin整合β1結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
蒼術(shù)(茅蒼術(shù))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 7-Ethylcamptothecin線粒體翻譯起始因子3抗體包裝1g
蒼術(shù)苷A英文名稱: (-)-Blebbistatin白介27β抗體包裝250mg
蒼術(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nedaplatin胰島樣生長因子1受體抗體包裝5g
佛羅里達(dá)側(cè)耳Pleurotus│florida 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR空腸彎曲菌試劑盒湖貝堿 ;peimine
煙色擬盤多毛孢Pestalotiopsis│adusta 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品空腸彎曲菌試劑盒黑芥子苷;Sinigrin
根瘤菌(檉麻)Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR克雷白氏桿菌試劑盒黃連堿;Coptisine chlori
HIV蛋白酶抑制劑(Dolutegravir sodium)硬脂鈉
月桂磺鈉
藻膠鈉
正釩鈉
正辛鈉
仲過鈉
重碳鈉
紫堇二鈉
D-葡萄糖