公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RNA helicase抑制劑(RK-33)
英文名稱:RK-33
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
RK-33是RNA helicase的抑制劑,可抑制DDX3的活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1070773-09-9 純度:97.11% 分子量:428.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
大腸埃希氏菌小鼠巨噬炎性蛋白3βAnti-OR52N4 Antibody人彈性蛋白(Elastase)
鐮刀菌人趨化因子Anti-OR56A1 Antibody人彈性蛋白(Elastase)
三葉草根瘤菌大鼠Smad1Anti-OR52W1 Antibody人白彈性蛋白(HLE)
Chitinophaga pinensis小鼠Ⅰ型膠原N末端肽Anti-OR52W1 Antibody人白彈性蛋白(HLE)
墨西哥假黃單胞菌人堿性成纖維生長因子9Anti-OR56B1 Antibody人彈性蛋白(Elastase)
膠孢大鼠Smad7Anti-OR56B4 Antibody人彈性蛋白(Elastase)
居成團玫瑰變色菌大鼠26S蛋白體Anti-OR56A3 Antibody人α淀粉(AMS/AMY)
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS24小鼠5核苷Anti-OR56B4 Antibody人α淀粉(AMS/AMY)
栗酒裂殖酵母人堿性成纖維生長因子6Anti-OR5A1 Antibody人堿性磷(ALP)
克魯斯假絲酵母小鼠CD19分子Anti-OR5AK3P Antibody人堿性磷(ALP)
哈茨木霉大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1Anti-OR5A2 Antibody人天青殺(AZU)
耐久腸球菌人堿性成纖維生長因子4Anti-OR5AP2 Antibody人天青殺(AZU)
茯苓人性成纖維生長因子1Anti-OR5AK3P Antibody人血管緊張肽A(ATA)
大腸埃希菌大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪Anti-OR5AP2 Antibody人血管緊張肽A(ATA)
芽胞桿菌小鼠CD3分子Anti-OR5AR1 Antibody人胰淀粉(PAMY)
根瘤菌小鼠CD4分子Anti-OR5AS1 Antibody人胰淀粉(PAMY)
環(huán)指蛋白156抗體靈芝(紅芝)人卵巢腺癌細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)
RRAD抗體*草菇L238人甲狀腺癌細胞TTA1(干細胞庫保藏)
環(huán)指蛋白128抗體#雙孢蘑菇人甲狀腺癌細胞KMH-2(干細胞庫保藏)
受體活性修飾蛋白1抗體#茶薪菇小鼠肥大細胞瘤細胞(干細胞庫保藏)
RNA helicase抑制劑(RK-33)嗜松青霉 γ-Methoxyisoeugenol
根霉屬 丁香酸甲酯
黃曲霉 蜂蜜曲
芭蕉維郎那霉 5,7-二甲氧基
產(chǎn)氣莢膜梭 A型 肉桂酸肉桂酯
Pseudomonas sp. alpha-乳香酸
蜃樓耶爾森氏 烏發(fā)
遼寧慢生根瘤 軟木花椒
根際微泡 金黃紫堇堿
大腸埃希氏 Pyrocatechol monoglucoside
黃曲霉 5-戊基間苯二
球孢鏈霉 Methyl 3,4,5-trimethoxycinnamate
冬克青霉 秦皮啶
假單胞屬 Ethyl rutinoside
節(jié)孢鐮孢桃生變種 巴靈