MT1-MMP抑制劑（NSC 405020）

MT1-MMP抑制劑（NSC 405020）公司*的產(chǎn)品：Shh/FITC 熒光標(biāo)記Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體IgG
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣Ⅱ型突變體（O139菌株）抗體IgG
SHC/FITC 熒光標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG
phospho-SHC (Tyr239/240

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MT1-MMP抑制劑（NSC 405020）

英文名稱：NSC 405020

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

鼠傷寒沙門氏菌Rhizobium leguminosarum大鼠己糖激(HK)

蘇云金芽胞桿菌尼日亞亞種Rhizobium leguminosarum大鼠糖原合成激(GSK)

解脂假絲酵母Rhizobium leguminosarum大鼠糖原合成激(GSK)

鞘單胞菌屬Rhizobium leguminosarum大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)

弗雷德里克斯堡假單胞菌Rhizobium leguminosarum大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)

繡色土生單胞菌Rhizobium leguminosarum大鼠高敏狀腺原(u-T3)

牛肝菌Rhizobium leguminosarum大鼠高敏狀腺原(u-T3)

大腸埃希菌Rhizobium leguminosarum大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)

芽孢桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)

海水球菌Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白9(Casp-9)

孢籃狀菌Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白9(Casp-9)

白黃阮繼生氏菌Rhizobium leguminosarum大鼠阿立新A(Orexin A)

彎孢Rhizobium leguminosarum大鼠阿立新A(Orexin A)

異常威克漢姆酵母Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白3(Casp-3)

糙卷霉Rhizobium leguminosarum大鼠胱天蛋白3(Casp-3)

類食品乳桿菌Rhizobium leguminosarum大鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)

G蛋白偶合受體激2抗體土壤三線鐮孢小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）OSK-1（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

蛋白激N2抗體粘帚霉屬小鼠胚胎干細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2四孢脈孢菌小鼠胚胎干細(xì)胞G-Olig2（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

T淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體殼青霉小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6（干細(xì)胞庫(kù)保藏）
MT1-MMP抑制劑（NSC 405020）易脆毛霉 硅鎂型吸附劑

釀酒酵母 三尖杉寧堿

鐮刀 LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂

聚生殼 依斯合劑

毛霉（加詞待譯） 紫檀芪

球孢白僵 分子篩13X型

猴頭菇 分子篩5A型

紅棕肉座 通關(guān)藤苷G

楊奇青霉 分子篩5A型

苘麻大莖點(diǎn) 通關(guān)藤苷I

頂青霉 苯脫氨培養(yǎng)基

綠色糖單孢 分子篩4A型

Passalora fulva 四氫小檗堿

釀酒酵母 分子篩3A型

綠色木霉 棉