G蛋白偶聯(lián)Rho GEFs抑制劑(Y16)

G蛋白偶聯(lián)Rho GEFs抑制劑(Y16)公司*的產(chǎn)品：MYL3/Myosin light chain 3/Biotin 生物標(biāo)記 肌球蛋白輕鏈3抗體IgG雙組份無吡啶滴定劑 2mg水/ml,測含水量較低樣品
MLH1/FITC 熒光標(biāo)記錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體IgG雙組份無吡啶滴定劑 1mg水/ml,測含水量較低樣品
MMP-1/FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-1抗體IgG雙組份無吡啶溶

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：G蛋白偶聯(lián)Rho GEFs抑制劑(Y16)

英文名稱：Y16

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

血桿菌人吡啶交聯(lián)物Anti-ZNF436 Antibody小鼠磷脂酰絲(PS)

雞腿173人骨橋Anti-ZNF541 Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)

豌豆根瘤菌人γ基丁Anti-ZNF498 Antibody小鼠磷甘油酯(PC/CPG)

魯氏接合酵母人P物質(zhì)受體Anti-ZNF460 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

叢毛單胞菌人環(huán)磷鳥苷Anti-ZNF575 Antibody小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)

總狀共頭霉人脂蛋白磷脂A2Anti-ZNF592 Antibody小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)

釀酒酵母人內(nèi)皮脂肪Anti-ZNF668 Antibody小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)

葡萄盤孢人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白αAnti-ZNF608 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)

淡紫擬青霉人骨成型蛋白7Anti-ZNF638 Antibody小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)

枯草芽孢桿菌枯草亞種人25羥基維生D3Anti-ZNF596 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

曲霉人白三烯B4Anti-ZNF682 Antibody小鼠絲/蘇蛋白磷(STK)

葡萄汁有孢漢遜酵母人腸脂肪結(jié)合蛋白Anti-ZNF691 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)

釀酒酵母人氧化低密度脂蛋白Anti-ZNF682 Antibody小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)

栗疫菌人骨髓抑制因子1Anti-ZNF695 Antibody小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)

鏈球菌(不定種)人脂聯(lián)Anti-ZNF7 Antibody小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)

華麗黃鏈霉菌人組Anti-ZNF75 Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)

囊泡相關(guān)膜蛋白2抗體扇形小孔菌人皮下脂肪細(xì)胞

01群小川型霍亂弧菌抗體亞粘團(tuán)串珠鐮孢人類粒細(xì)胞系

鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體土生寬鐮孢霉恒河猴腎細(xì)胞

囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體松口蘑（斜面）人漿細(xì)胞白血病細(xì)胞
G蛋白偶聯(lián)Rho GEFs抑制劑(Y16)血紅鞘氨單胞 4，4-雙（二甲氨基）硫代二苯甲酮

費(fèi)氏中華根瘤 四丁基硫酸氫

隆德假單胞 蒽酮

炭黑曲霉 茚三酮

弗雷德里克斯堡假單胞 4-(4-偶氮)-1-萘

旋毛殼 乙二縮雙（鄰氨基）

哈茨木霉 2-萘

日本外擔(dān) 1-萘

黃曲霉 4--1-萘

豬丹絲 化血紅

果蔬汁  山梨酸、 氨三乙酸

球孢白僵 2,4,6-三溴-3-羥基

嗜芽孢桿 3,5-二-2-羥基苯磺酸鈉

貝氏葡萄座腔 天青石藍(lán)

山丘鏈霉 2,2′-聯(lián)氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二鹽