公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MDM2抑制劑(SAR405838)
英文名稱:SAR405838
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SAR405838是一種高效的選擇性MDM2抑制劑,與MDM2結(jié)合,Ki值為0.88nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1303607-60-4 別名:MI-77301 純度:98.95% 分子量:562.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
香栓菌促甲狀腺釋放激Anti-H4C1 Antibody人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)
耐久腸球菌Anti-HABP2 Antibody人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)
豌豆根瘤菌甲狀腺T4偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-H4C1 Antibody人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)
雷蘑重組人腫瘤壞死因子Anti-H4C1 Antibody人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)
枇杷炭疽病菌端粒逆轉(zhuǎn)錄Anti-HAND1 Antibody人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)
大腸埃希菌抗菌肽Anti-HARS Antibody人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)
乳乳球菌乳亞種拓普西異構(gòu)Ⅰ抗原Anti-HAND1 Antibody人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)
根瘤菌轉(zhuǎn)鐵蛋白Anti-HAT1 Antibody人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)
Marisediminicola色羥化(多肽)Anti-HAO1 Antibody人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)
長孢黃色鏈霉菌葡萄膜自身抗原UacaAnti-HAUS8 Antibody人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)
核盤菌黃熱病包膜糖蛋白Anti-HBP1 Antibody人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
瓜枝孢(黃瓜黑星病菌)2,4-二氧乙偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-HCCS Antibody人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)
繩狀曲霉抗尿激/血管升壓抗原(和肽)Anti-HAUSP(USP7) Antibody人抗DNAB抗體(anti-DNase B)
大腸埃希菌豬藍(lán)耳病病M蛋白Anti-HCAR3 Antibody人抗DNAB抗體(anti-DNase B)
蔗糖伯克霍爾德氏菌雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病)偶聯(lián)辣根過氧化物Anti-HCLS1 Antibody人抗BP180抗體(BP180-Ab)
醋化醋桿菌大鼠分泌型IgA(抗原)Anti-HCFC1 Antibody人抗BP180抗體(BP180-Ab)
細(xì)胞分化蛋白SEPT11抗體糙皮側(cè)耳、平菇人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞
晶狀體發(fā)育相關(guān)蛋白Six3抗體雪白根霉人肺癌細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)
細(xì)胞分化蛋白SEPT14抗體爪哇根霉人侵襲性脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞
精結(jié)合蛋白2抗體戴爾根霉人膀胱癌細(xì)胞
MDM2抑制劑(SAR405838)鮑氏不動桿 硫代硫酸
大腸埃希氏 無水亞硫酸
雜色曲霉原變種 焦銻酸
盤長孢狀盤孢 磷酸三
小平菇(秀珍菇) 氟鋁酸
科恩根霉 碳酸氫
柱孢 硫酸鉻
化鉍
巨型艾耳球蟲 硫酸
普通變形 硫酸
肺炎克雷伯氏肺炎亞種
紅細(xì)屬 化
毛霉屬 結(jié)晶碳酸
球紅酵母 無水碳酸
雞白痢沙門氏 溴化