商品介紹:
EL102是HIF1α的抑制劑,能夠抑制微管蛋白聚合和減少它的穩(wěn)定性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1233948-61-2 純度:99.15% 分子量:384.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
HIF1α抑制劑(EL-102) | EL-102 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
竹喙球菌Haloferax volcanii
猴頭菌Haloferax viridis
栗酒裂殖酵母Haloferax alexandrinus
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Haloferax alexandrinus
大腸埃希菌Haloferax alexandrinus
黑色附球菌Haloferax alexandrinus
假單胞菌屬Haloferax alexandrinus
熒光假單胞菌Haloferax alexandrinus
赭色擲孢酵母Haloferax lucentensis
放射桿狀根瘤菌Haloferax volcanii
英諾克李斯特氏菌Haloferax alexandrinus
豇豆慢生根瘤菌Haloferax prahovense
串珠鐮孢Haloferax alexandrinus
樹舌靈芝(平蓋靈芝)Haloferax volcanii
尖頂絲膜菌Haloferax volcanii
產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型Haloferax volcanii
豬白介1(IL-1)免疫試劑盒胞質(zhì)乙脫氫1抗體人白介-5(IL-5)德爾塔林
豬白蛋白免疫試劑盒ADP核糖基化樣因子ARL3抗體人白介-5(IL-5)燈盞花乙甲酯
豬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒花生四烯15脂氧合1抗體人白介4(IL-4)地奧司明
豬γ淀粉(AMY)免疫試劑盒癌增強蛋白2抗體人白介4(IL-4)地膚子皂苷Ic
HIF1α抑制劑(EL-102)SMURF2 英文名稱: Smad蛋白E3泛素連接酶2抗體 0.1ml
phospho-ERK5 (Ser496) 英文名稱: 磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體 0.1ml
Smad 7抗體 Anti-Smad7 0.1ml
Anti-TFF3 /FITC 熒光素標記三葉肽因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MARCKS (Ser162) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體 規(guī)格 0.1ml
Nestin 巢蛋白(神經(jīng)上皮干細胞蛋白)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg