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微管(tubulin)聚合抑制劑(Auristatin PE)

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更新時間:2022-05-12 15:27:41瀏覽次數(shù):207

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
貨號 GOY-01X11442 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Auristatin PE
微管(tubulin)聚合抑制劑(Auristatin PE)公司正在出售的產(chǎn)品:Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光素標記抗磷酸化原癌基因c-Met抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine TG 兔抗甲狀腺球蛋白 (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格:

詳細介紹

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

微管(tubulin)聚合抑制劑(Auristatin PE)

Auristatin PE

1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg

1~3天

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:

Auristatin PE是一種新型合成的Dolastatin10衍生物,抑制劑微管(tubulin)聚合。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

CAS號:149606-27-9

別名:Soblidotin;TZT-1027

純度:99.76%

分子量:701.98

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

白乳菇Bacillus thuringiensis

巨大芽胞桿菌Bacillus thuringiensis

黃曲霉Bacillus thuringiensis

棕黑腐質(zhì)霉Bacillus thuringiensis

亞黃絲蓋傘Bacillus thuringiensis

炭疽芽胞桿菌Lysinibacillus sphaericus

青霉屬Lysinibacillus sphaericus

檸檬色游動球菌Bacillus thuringiensis

聚生殼菌Bacillus thuringiensis

病研所芽孢桿菌Bacillus thuringiensis

麗鹽單胞菌Bacillus thuringiensis

新瀉節(jié)桿菌Bacillus thuringiensis

黑曲霉Bacillus thuringiensis

毛栓孔菌Bacillus thuringiensis

Pseudomonas extremaustralisBacillus thuringiensis

枯草芽胞桿菌Bacillus thuringiensis

磷化視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白p107抗體固氮鞘單胞菌肉桂(地)鏈霉菌

磷化A-Raf抗體光村短波單胞菌球孢毛殼

磷化轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體偽血鞘單胞菌盤多毛孢屬菌種

磷化肌動蛋白相關(guān)蛋白2抗體水稻節(jié)桿菌泡波曲霉
微管(tubulin)聚合抑制劑(Auristatin PE)SRXN1 英文名稱: 硫氧還蛋白1抗體 0.2ml

ErbB 2 英文名稱: HER2受體抗體 0.1ml

轉(zhuǎn)移生長因子–β3抗體 Anti-TGF-β3 0.1ml

Anti-TLR9/CD289/FITC 熒光素標記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷酸化抑制基因LATS1抗體 規(guī)格 0.1ml

BECN1(Beclin1) 一種抑癌基因(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

 


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