DGAT1抑制劑（PF-04620110）

DGAT1抑制劑（PF-04620110）公司*的產(chǎn)品：Anti-CSF3/FITC 熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Nrf2/FITC 熒光素標(biāo)記核因子2相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：DGAT1抑制劑（PF-04620110）

英文名稱：PF-04620110

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

深凹杯傘基合成抗體Human TMEM35 ELISA Kit大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)免疫試劑盒

槐生多年臥孔菌高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體Human TMEFF2 ELISA Kit大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激(GC)免疫試劑盒

綠色木霉高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體Human TLK1 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮脂肪(EL)免疫試劑盒

鴨疫里氏桿菌戊二酰脫氫抗體Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) ELISA Kit大鼠內(nèi)皮抑(ES)免疫試劑盒

皮殼青霉GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體Human TLK2 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS/NOS3)免疫試劑盒

麥根腐平臍蠕孢絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體Human TM7SF2 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮轉(zhuǎn)換2(ECE2)免疫試劑盒

大腸桿菌廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體Human TM7SF3 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮轉(zhuǎn)換1(ECE1)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體Human TM9SF4 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮受體A(ETR-A)免疫試劑盒

耐寒短桿菌磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體Human TINAGL1 ELISA Kit大鼠內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體Human TINAG ELISA Kit大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)免疫試劑盒

中間普氏菌間隙連接蛋白10抗體Human PZP(Pregnancy zone protein) ELISA Kit大鼠內(nèi)(ET)免疫試劑盒

平田頭菇3-1間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體Human TIP47 ELISA Kit大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)免疫試劑盒

鐮雄腐霉間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體Human TIMM13 ELISA Kit大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒

米根霉間隙連結(jié)蛋白31.9抗體Human TIPIN ELISA Kit大鼠膜相關(guān)磷脂A2(PLA2G2A)免疫試劑盒

白地霉甘油激2抗體Human TJAP1 ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)免疫試劑盒

黃發(fā)鏈霉菌β-半乳糖苷1/β-Gal/彈性蛋白受體1抗體Human TIMM17A ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒

: HBUM84148資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：用于GC-HS,≥99.8%(GC)基原薯蕷皂苷

聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級(jí)基橙皮苷

匍枝根霉原變種Rhizopus│stolonifer var. stolonifer 質(zhì)量規(guī)格：99%,離子對(duì)色譜級(jí)木蘭花堿
DGAT1抑制劑（PF-04620110）大葉紫珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗體包裝5g

大棗（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Butyl stearateFAM46C蛋白抗體包裝25ml

大皂角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C10E6舌癌耐藥相關(guān)蛋白1包裝1g

玳瑁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C12E10FAM129B蛋白抗體包裝5g

丹參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C12E9微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝1g

丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗體包裝5g

丹參鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗體包裝5mg

丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗體包裝25ml

丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗體包裝5ml

丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白抗體包裝1g

丹酚A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗體包裝5g

丹酚B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Canada balsamFAM55D蛋白抗體包裝1g

丹酚B二酯英文名稱： Caprolactam組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體包裝25g

丹酚C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗體包裝5g

丹酚D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Castor oilFAM13C1蛋白抗體包裝1g 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)