RAD51抑制劑(RI-1)

RAD51抑制劑(RI-1)公司*的產(chǎn)品：CK7/FITC 熒光標(biāo)記角蛋白7抗體IgG2--5-氟嘧啶 97%
CK7/FITC 熒光標(biāo)記抗角蛋白7抗體(大、小鼠)IgG2,2-二琥珀 98%
CK10/FITC 熒光標(biāo)記角蛋白10抗體IgG2,2-二琥珀酐 98%
CK10/RBITC 紅色熒光羅丹明標(biāo)記角蛋白10抗體IgG2,2-二氟-1,3-苯并二噁茂 95%
CK14/FI

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：RAD51抑制劑(RI-1)

英文名稱：RI-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

谷棒桿菌熒光標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-HGFAC Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)

頭狀禿馬勃熒光標(biāo)記雞卵白蛋白Anti-HGH1 Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)

綠黃鏈霉菌熒光FITC標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)Anti-HGH1 Antibody人晶體蛋白α(Cryα)

Aeromonas aquariorum熒光標(biāo)記牛IgGAnti-HIBADH Antibody人晶體蛋白α(Cryα)

林生毛霉熒光標(biāo)記牛IgMAnti-HIF3A Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)

澳型核果褐腐病菌熒光標(biāo)記雞IgGAnti-Hip Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)

密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種熒光標(biāo)記雞IgMAnti-HIF3A Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)

甜菜慢生根瘤菌熒光標(biāo)記狗IgGAnti-HIPK4 Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)

熱葡糖苷土芽孢桿菌熒光標(biāo)記狗IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)

欽海特德沃斯氏菌熒光FITC標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Anti-HIST1H2BB Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)

枯草芽孢桿菌熒光標(biāo)記羊IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)

枯草芽胞桿菌枯草亞種熒光標(biāo)記豚鼠IgGAnti-HIRA Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)

蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種熒光標(biāo)記豚鼠IgMAnti-Histone H3 Antibody人抗核周因子抗體(APF)

多粘類芽胞桿菌熒光標(biāo)記馬IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核周因子抗體(APF)

長柄條孢牛肝熒光標(biāo)記馬IgMAnti-HK3 Antibody人抗核抗體(ANA)

乳桿菌屬熒光標(biāo)記人IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核抗體(ANA)

紅細(xì)胞膜蛋白STOM抗體白腐菌人肝腹水腺癌細(xì)胞

鈉依賴性脯轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體小刺青霉大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞

基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體產(chǎn)紫青霉人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（白介21基因修飾）

鈉離子通道蛋白7α/Na+CPtypeVIIα抗體淡紫青霉人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
RAD51抑制劑(RI-1)炭疽芽胞桿 2-巰基苯并噻唑

鮭色鎖擲酵母 吲唑

中慢生華癸根瘤 2-(4-叔丁基苯)-5-(4-聯(lián)苯基)-1,3,4-噁唑

白平195 苯并咪唑

干草鞘氨單胞 2-氨基苯并噻唑

洋蔥曲霉 2-氨基苯并咪唑

雜色曲霉 3-氨基-9-乙基咔唑

產(chǎn)氣莢膜梭 A型 鹽酸咪唑

釀酒酵母 咪唑

冷溫木克酵母 1，4-雙（5-苯基-2-惡唑）苯

大腸埃希氏(大腸桿) 2,5-二苯惡唑

釀酒酵母 氧化金

厭糖鹽土生古 乙酸銀

秦氏蜜環(huán) 硫酸銀

卵孢白僵 化銀 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)