商品介紹:
Cariporide(HOE-642)是選擇性的Na+/H+交換抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:159138-80-4 別名:HOE-642 純度:98.57% 分子量:283.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2-氧基雌二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pemetrexed Disodium中心體和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
2-巰基*(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phthalylsulfathiazole9號染色體開放閱讀框153抗體包裝250mg
2-巰基乙烷磺鈉(美司那)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pioglitazone base4號染色體開放閱讀框19抗體包裝25g
2,3-二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pioglitazone base4號染色體開放閱讀框27抗體包裝5g
2‘-脫氧胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pioglitazone HCl4號染色體開放閱讀框22抗體包裝1g
3,4,5-三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pioglitazone HCl4號染色體開放閱讀框14抗體包裝5g
3,4-二氧基肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pizotifen MalateX染色體開放閱讀框21抗體包裝1g
3-基-N-[4(-三基)基]異惡唑-4-酰...英文名稱: Polymyxin B Sulfate磷化C端結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
3-基黃-8-羧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polymyxin B Sulfate鈣粘附蛋白8抗體包裝1g
3-酰利福霉SV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pramlintide Acetate8號染色體開放閱讀框192抗體包裝5g
3-奎寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pravastatin Sodium 21號染色體開放閱讀框87抗體包裝25g
3-乙氧基-4-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pravastatin Sodium 21號染色體開放閱讀框91抗體包裝5g
3-吲哚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisolone22號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
3,5-二基-6-吡-2-羧酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisolone20號染色體開放閱讀框196抗體包裝250mg
4-N-去基安乃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pimavanserin;ACP-1035號染色體開放閱讀框35抗體包裝10g
球蓋菇Stropharia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:USP級,4400u/mg血小板生成受體試劑盒遠(yuǎn)志皂苷元;Tenuigenin
: DSM20336資源名稱: 戊糖片球菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng)血小板生成試劑盒異去氫鉤藤堿;Isocorynoxein
宇佐美曲霉Aspergillus│usamii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板生長因子試劑盒鷹嘴豆芽A;Biochanin A
Na+/H+交換抑制劑(Cariporide)無毛發(fā)蛋白抗體異莪術(shù)烯 D-Cyclopropylalanine
心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體異佛手柑內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) D-tert-Leucine hydrochloride
乙酰化組蛋白H4(K16)抗體異佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Norvaline
人類白抗原G抗體(N端)異甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) H-D-Phe-OMe·HCl
人類白抗原G抗體(C端)異甘草(標(biāo)準(zhǔn)品) Ac-D-Glu-OH
缺氧誘導(dǎo)因95抗體異橄欖樹脂 Z-D-Leu-OH
泛蛋白連接E2抗體異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖(1-4)-... D-allo-Isoleucine
同源盒蛋白HOXC9抗體異鉤藤(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludrocortisone acetate
環(huán)化核苷調(diào)控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體異葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludrocortisone acetate