商品介紹:
Berberine chloride hydrate能有效的抑制多種癌細(xì)胞增殖,促進(jìn)凋亡,能影響MAPK和Wnt/β-catenin通路。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):141433-60-5 別名:Natural Yellow 18 純度:99.56% 分子量:389.83 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
癌細(xì)胞增殖抑制劑 | Berberine chloride hydrate | 1mL(10mM)|5g | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
尖孢隔指孢磷化蛋白激C(T500)抗體Anti-CAPN1 AntibodyS100蛋白(S-100)
根際鏈霉菌磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-CARD4/NOD1 AntibodyS-100B蛋白(S-100B)
葡萄球菌磷化p21激活激1抗體Anti-Carbonic Anhydrase 13/CA13 AntibodyS100B蛋白(S-100B)
黑曲霉磷化p21激活激2抗體Anti-CARD9 AntibodyRNA結(jié)合蛋白FUS(FUS/TLS)
靈芝(紅芝, 赤芝)磷化p21激活激3抗體Anti-Cardiotrophin1(CT-1) AntibodyRho家族GTP1(RND1)
釀酒酵母磷化p21激活激1/2/3抗體Anti-CARM1 AntibodyRho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)
毛柄金錢菌(金針菇)磷化核糖體S6蛋白激抗體Anti-CASP1(P10) AntibodyRho GDP解離抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)
聚貪噬菌內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體Anti-CASP1(P20) AntibodyREST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)
蠟狀芽孢桿菌蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體Anti-CARS Antibodyras同源物基因家族成員b(RHOB)
腸膜明串珠菌前列腺特異膜抗原抗體Anti-CASP1(P20) AntibodyP選擇糖蛋白配體1(PSGL-1)
假單胞菌磷脂酰肌激抗體Anti-CASP10 AntibodyP選擇(P-Selectin/CD62P/GMP140)
灰平鏈霉菌胎盤生長(zhǎng)因子抗體Anti-CASP12 AntibodyP選擇(P-Selectin/CD62P)
污黑腐皮殼蛋白激A抗體Anti-CASP14(P10) AntibodyP選擇(P-Selectin)
死亡谷芽孢桿菌蛋白激C beta 1/2抗體Anti-CASP2 AntibodyP物質(zhì)受體(SP-R)
豆芽菌胎盤生長(zhǎng)因子抗體Anti-CASP2(P12) AntibodyP物質(zhì)(SP)
禾谷胎盤生長(zhǎng)因子抗體Anti-CASP2(small) AntibodyP糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)
病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 質(zhì)量規(guī)格:純度98%,BR
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,選擇性p110δ抑制劑
杏鮑菇Pleurotus│eryngii 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
癌細(xì)胞增殖抑制劑泡盛曲霉 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(中國(guó)藥典)弓形蟲Elisa
谷氨酸棒桿 新生霉脈絡(luò)叢腦膜炎病Elisa
擬莖點(diǎn)霉 大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基抗脊髓灰質(zhì)炎Virues1-3 IgG抗體Elisa
釀酒酵母 支原體瓊脂培養(yǎng)基(含精氨酸)糜蛋白Elisa
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 麥迪、麥白霉檢定培養(yǎng)基(普通輕質(zhì)斜面培養(yǎng)基)白三烯Elisa
溫特曲霉煙色變種 阿奇霉檢定培養(yǎng)基肥大類胰蛋白Elisa
指甲絨隱球酵母 制霉檢定培養(yǎng)基類胰蛋白Elisa
檸條根瘤 志賀氏增肉湯腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa
假白布勒酵母 多粘B用培養(yǎng)基神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3Elisa
枯草芽孢桿 檢定培養(yǎng)基9號(hào)血小板生成Elisa
粗毛栓 精氨酸雙水解試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD)白介32Elisa
枯草芽胞桿 麥康凱瓊脂(不含鹽)高遷移率族蛋白B1Elisa
強(qiáng)壯類芽孢桿 血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)8羥基脫氧鳥(niǎo)苷Elisa
豬瘟病 多粘B白介17Elisa
熒光假單胞 腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基成纖維生長(zhǎng)因子Elisa