以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MMP抑制劑(CTS-1027) | CTS-1027 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CTS-1027是一種有效的MMP抑制劑,能夠作用于MMP2和MMP13,IC50值分別為0.3nM和0.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):193022-04-7 別名:RS 130830;Ro 1130830;CTS1027;CTS 1027;RS130830;Ro1130830;RS-130830;Ro-1130830 純度:98.72% 分子量:425.88 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌人抵抗Anti-ZNF875 Antibody小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)
褐革菌人骨特異性堿性磷BAnti-ZNF76 Antibody小鼠少突膠質(zhì)髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
韋斯特迪克氏曲霉人骨鈣/骨谷蛋白Anti-ZNFN1A2 Antibody小鼠少突膠質(zhì)髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)
腐爛粘束梗霉人可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-ZNF771 Antibody小鼠抗核抗體(ANA)
樟疫霉人1,25二羥基維生D3Anti-ZNF785 Antibody小鼠抗核抗體(ANA)
球孢白僵菌人組蛋白H2bAnti-ZP4 Antibody小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)
產(chǎn)短桿菌人骨保護(hù)Anti-ZRANB2 Antibody小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)
弓形蟲(RH株)人骨成型蛋白受體ⅡAnti-ZNHIT1 Antibody小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)
新城疫病人骨成型蛋白受體1AAnti-ZNRF2 Antibody小鼠解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)
長柄條孢牛肝人骨成型蛋白4Anti-ZRANB2 Antibody小鼠氧化型(GSGS)
黑曲霉人骨成型蛋白2Anti-ZSCAN26 Antibody小鼠氧化型(GSGS)
大腸埃希氏菌人Anti-ZZZ3 Antibody小鼠還原型(GSH)
香菇人甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲蛋白Anti-ZSCAN16 Antibody小鼠還原型(GSH)
木耳屬人周期依賴性激7Anti-ZSCAN22 Antibody小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)
丁香假單胞菌人周期依賴性激2Anti-ZSCAN26 Antibody小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)
構(gòu)巢曲霉人周期依賴性激1Anti-HRH2(Histamine receptor H2) Antibody小鼠c-fos
VWCE抗體福毛鬼傘(斜面)兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞
Wnt1信號(hào)通路蛋白3抗體禾谷鐮孢菌(斜面)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3)
WD重復(fù)膜蛋白61抗體雞縱菌人膽管癌細(xì)胞
EBV核蛋白2抗體巴西蘑菇正常大鼠腎細(xì)胞(EGF受體陽性)
MMP抑制劑(CTS-1027)耐久腸球 魯米諾
枯草芽孢桿 焦油紫
交鏈孢 吖啶紅
膨大彎頸霉 鈣鎂試劑
樟疫霉 亮藍(lán)
大腸埃希氏桿 石炭酸復(fù)紅
布氏正青霉 隱色孔雀石綠
水生黃桿 隱色結(jié)晶紫
孟氏假單胞 赤蘚紅
腐生葡萄球 酸性偶氮紅
彩色豆馬勃
坎氏弧 7-氨基-4-甲基
豌豆根瘤 甲基藍(lán)
50876(茯苓 ) 粘蛋白胭脂紅
植物乳桿 滂天藍(lán)