ERK二聚化抑制劑(DEL-22379)

ERK二聚化抑制劑(DEL-22379)公司正在出售的產(chǎn)品：phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化巨噬集落激因子受體抗體IgG3,4-己二酮 96%,FCC
GDF-1/FITC 熒光標(biāo)記抗生長(zhǎng)、分化因子1抗體IgG茉莉凈油
GDF-8/FITC 熒光標(biāo)記肌生長(zhǎng)抑制抗體IgG薰衣草油 natural
GDF8/MSTN/FITC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

立枯絲核菌大鼠B淋巴瘤因子2Anti-OXR1 Antibody人β內(nèi)酰(β-lactamase)

污黑腐皮殼大鼠CXC趨化因子受體3Anti-ORC1 Antibody人β內(nèi)酰(β-lactamase)

棘孢小單孢菌小鼠腫瘤壞死因子βAnti-OSR2 Antibody人β甘露糖苷(β Manase)

Arenibacter sp.人食欲/阿立新BAnti-OVOL1 Antibody人β甘露糖苷(β Manase)

灰平鏈霉菌小鼠Ⅳ型膠原Anti-P2RY11 Antibody人β半乳糖苷(βGAL)

孢囊放線菌大鼠中性粒彈性蛋白Anti-P2RY13 Antibody人β半乳糖苷(βGAL)

立枯絲核菌人促睡眠肽Anti-P2RY4 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)

PET-22b人6-羥多巴Anti-P2RY14 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)

依諾斯類芽胞桿菌小鼠己糖激Anti-P2RY8 Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)

枯草芽孢桿菌大鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子Anti-P4HB Antibody人αL艾杜糖苷(IDUA)

宇佐曲霉小鼠脫氫E1Anti-p90 RSK1 Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)

新型隱球酵母原變種大鼠羥脯Anti-PACRG Antibody人α2抗纖溶(α2-AP)

金黃桿菌屬人心納Anti-PABPC5 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)

榛色假單胞菌小鼠糖原合成激Anti-PABPC3 Antibody人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)

地衣芽胞桿菌大鼠骨保護(hù)配體Anti-PACS1 Antibody人L解(PAL)

小孢根霉華變種人神經(jīng)髓鞘蛋白Anti-PAK2 Antibody人L解(PAL)

RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體#牛肝菌屬人小氣道上皮細(xì)胞

Ras樣蛋白A抗體楊褐盤二孢多芽管轉(zhuǎn)化型人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基：（原代細(xì)胞）

Rh血型C抗原抗體松色二孢鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

環(huán)指蛋白11抗體盤多毛孢菌小鼠輔助性T細(xì)胞
ERK二聚化抑制劑(DEL-22379)釀酒酵母 白果內(nèi)酯

豬丹絲 和厚樸

格氏假單胞* 銀杏內(nèi)酯C

金黃色隱球酵母 銀杏內(nèi)酯B

靈芝 2,4-Dihydroxy-6-methoxyacetophen

氧化硫副球 2,2,6,6-四甲基酮鹽酸鹽

松口蘑 駱駝蓬堿

蘇云金芽胞桿 Gallocatechin

枯草芽孢桿 4-甲氧基

交鏈孢 黃瓦胡椒 A

土曲霉金色變種 乙基beta-D-吡喃葡萄糖苷

孟氏假單胞 Dihydroconiferyl alcohol

紅球 3,4-二甲氧基苯甲酰

Erwinia BETA-細(xì)辛腦

植物乳桿 辛可寧