谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑（Azaserine）

谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑（Azaserine）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-OCT1 /FITC 熒光素標記陽離子轉(zhuǎn)運器1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
周期素依賴性激酶5抗體 Anti-CDK5 1ml
Goat

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

棲藻海桿狀菌Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

紫荊假諾氏菌Candida guilliermondii

佛雷德里克斯堡假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

棕灰口蘑Candida kefyr

嗜油假單胞菌Saccharomyces cerevisiae

大腸埃希菌Candida valida

土星擬威爾酵母Pichia farinosa

蘇云金芽孢桿菌Pichia farinosa

小單孢菌Pichia membranifaciens

香菇*Saccharomyces cerevisiae

阿木吉氏鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae

太湖類芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae

脆弱擬桿菌Saccharomyces cerevisiae

絳紅褐游動放線菌Saccharomyces bayanus

米曲霉Saccharomyces cerevisiae

小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒心肌錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪甲苷

小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體人嗜鉻蛋白A(CgA) 黃芪皂苷I

小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷II

小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白(pRB) 黃芪皂苷III
谷氨酰胺酰胺轉(zhuǎn)移酶抑制劑（Azaserine）SCN8A 英文名稱： 鈉通道蛋白8α抗體 0.1ml

Anei-ENPP2 英文名稱： 自分泌運動因子抗體 0.1ml

肺表面活性蛋白B抗體 Anti-SP-B 0.1ml

Anti-TGM3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)谷氨酰酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化原活化蛋白激酶MAP4K4抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷酸化活化復制因子2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg