bromodomain抑制劑(GSK 525768A)

bromodomain抑制劑(GSK 525768A)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PAX1/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
多巴胺受體-D1抗體 Anti-DAD1 0.1ml
Rab

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

萎蔫短小桿菌Candida parapsilosis

扁平鏈霉菌Ustilago spermophora

松口蘑Candida sp.

羅丹塞伯林德納氏酵母Cryptococcus pseudolongus

馬鞍山紅桿菌Sporobolomyces beijingensis

減蛋綜合征病Cryptococcus sp.

BarrientosiimonasCryptococcus longus

玫瑰色考克氏菌Cryptococcus sp.

栗疫菌Sporobolomyces beijingensis

蘇云金芽孢桿菌Pseudozyma hubeiensis

黑曲霉Sporobolomyces oryzicola

簡(jiǎn)單芽孢桿菌Candida parapsilosis

香栓孔菌Cryptococcus longus

米根霉Candida parapsilosis

釀酒酵母Metschnikowia koreensis

球孢白僵菌Candida sp.

小鼠(LPA)免疫試劑盒Bcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)人參皂苷F3

小鼠胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒半乳糖轉(zhuǎn)移7亞基β1,4抗體人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)人參皂苷F4

小鼠胞內(nèi)離子通道蛋白1(CLIC1)免疫試劑盒BEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體人髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)人參皂苷Rb1

小鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體人髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)人參皂苷Rb2
bromodomain抑制劑(GSK 525768A)p70 S6 kinase beta 英文名稱： 核糖體蛋白S6激酶1抗體 0.2ml

phospho-EIF4G1 (Ser1238) 英文名稱： 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 0.1ml

神經(jīng)生長(zhǎng)因子抗體 Anti-NTN 0.1ml

Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NTRK2/TrkB (Tyr515) 磷酸化酪氨酸激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml

Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg