詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:SIRT1和SIRT2抑制劑(Tenovin-1)
英文名稱:Tenovin-1
產品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
Tenovin-1是SIRT1和SIRT2抑制劑,及p21和p53活化劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:380315-80-0 純度:99.39% 分子量:369.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
靈芝屬人磷化腺苷活化蛋白激Anti-IL2 Receptor gamma/IL2RG Antibody小鼠c-fos
擬青霉人乳脫氫Anti-Leptin receptor(LEPR)(長亞型) Antibody小鼠c-jun
畢赤酵母人解整合樣金屬蛋白9Anti-GABA A Receptor gamma 2/GABRG2 Antibody小鼠c-jun
粗皮側耳(平菇)人β位淀粉樣前體蛋白裂解2Anti-Endothelin A Receptor/ET-A/EDNRA Antibody小鼠抗透明帶抗體(aZP)
金毛殼人核苷磷化1Anti-Neurotensin receptor 2 Antibody 小鼠抗透明帶抗體(aZP)
根瘤菌人乙脫氫Anti-Olfactory receptor 5D3 Antibody小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)
Acinetobacter shuensis人Rho家族GTP1Anti-Phospho-GABAA Receptor beta3 (Ser408/409) Antibody小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)
枯草芽孢桿菌人受體TNFRSF結合絲蘇激2Anti-Prostacyclin Receptor Antibody小鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
蠟狀芽孢桿菌人磷脂爬行1Bacillus sp.小鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)
紫桿菌(可提供)人3-羥基-3-甲基戊二酰合1Saccharomyces cerevisiae小鼠Qa淋巴抗原2(Qa-2)
木耳(臺耳134)人嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員12Rhizobium radiobacter (Beijerinck and van Delden) Young et a小鼠Qa淋巴抗原2(Qa-2)
嗜鹽動性球菌人嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員3Lysinibacillus sphaericus (Meyer and Neide) Ahmed et al.小鼠D-乳脫氫(D-LDH)
羅倫氏隱球酵母人嗜性白血球相關之RNA水解酵家族成員2Colletotrichum boninense Moriwaki, Toy. Sato & Tsukib.小鼠D-乳脫氫(D-LDH)
中間氣單胞菌人二氫嘧啶樣3Escherichia coli小鼠孕受體(PROGR)
殼菌人色酰tRNA合成Escherichia coli小鼠孕受體(PROGR)
米根霉人色酰tRNA合成Listeria monocytogenes小鼠胰島樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)
Wnt信號抑制因子1抗體茶樹菇慢性粒細胞白血病細胞
信號通路Wnt2抗體紅芝小鼠原B細胞株
信號通路WNT8A抗體蘇云金芽孢桿菌阿馬金亞種人正常結直腸粘膜細胞
轉錄因子WSTF抗體蘇云金芽孢桿菌安達樓亞種人小腸上皮細胞(干細胞庫保藏)
SIRT1和SIRT2抑制劑(Tenovin-1)副豬嗜血桿 二苯磺酸鈉
金針菇 間甲紫
產脲節(jié)桿 比布里希猩紅
球孢白僵 鄰苯二紫
水叢毛單胞 5-硝基鄰菲啰啉
弗氏鏈霉 玫瑰紅酸鈉
谷棒桿 玫紅酸
豇豆慢生根瘤 玫瑰紅6G
粗壯假絲酵母 玫瑰紅三羧酸
枯草芽孢桿 鄰菲啰啉鹽酸鹽
紫芝 巨豆三烯酮
灰綠曲霉 3’-甲氧基芹菜苷
土壤短波單胞 4-甲氧基水楊酸
茶樹菇 桔梗皂苷元
巴氏醋桿 焦袂康酸
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)