PDE-5抑制劑（Sildenafil）

產(chǎn)品屬性：
中文名稱：PDE-5抑制劑（Sildenafil）
英文名稱：Sildenafil
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
Sildenafil是磷酸二酯酶5（PDE-5）抑制劑，IC50為5.22nM，可能是好的可作用于勃起功能紊亂的化合物。
注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！
CAS號(hào)：1

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PDE-5抑制劑（Sildenafil）

英文名稱：Sildenafil

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

次野鳶尾黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Acid blue 40FA20A抗體包裝500mg

甘草查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Acid Red 6B成纖維生長(zhǎng)因子18抗體包裝1g

槐苷英文名稱： Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus叉頭蛋白O1抗體包裝25g

梨苷英文名稱： Aflatoxin B2纖維母生長(zhǎng)因子6抗體包裝5g

梨果（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aflatoxin G1免疫球蛋白A Fc段受體1抗體包裝25g

梨葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aflatoxin G2脂肪延長(zhǎng)抗體包裝5g

芒柄花苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Alizarin yellow R , sodium salt巖藻糖轉(zhuǎn)移2抗體包裝100mg

芒柄花；芒柄花黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ALL, D-Allose雞白痢、雞傷寒抗體包裝500mg

玫果（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： alpha-D-Glucose-1-phosphate, disodium salt, hydrate范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體包裝250mg

囊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： alpha-Methylcinnamic acid卵泡抑抗體包裝100mg

桐堿英文名稱： Aluminum acetate, basicFas活化的絲/蘇激抗體包裝25g

五加（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum fluoride trihydrate脆性組三聯(lián)體抗體包裝5g

五加苷E（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum oxide, active纖維母表面蛋白抗體包裝25g

五加皂苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum oxide, active前列腺E受體4相關(guān)蛋白抗體包裝5g

楤木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum potassium sulfate docecahydrateFLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端）包裝5g

樟疫霉Phytophthora│cinnamomi Rands 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)腎上腺試劑盒去烏藥堿;Higenamine

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%，標(biāo)準(zhǔn)品腎上腺皮質(zhì)抗體試劑盒芹菜苷;Apiin

豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR蛋白試劑盒1-羥基-2,3,4,7-四氧基山山
PDE-5抑制劑（Sildenafil）性磷抗體抗平滑肌抗體(ASMA)檢測(cè)試劑盒ASMA ELISA Kit

性磷抗體抗凝血受體(ATR)檢測(cè)試劑盒ATR ELISA Kit

光激A相互作用蛋白1抗體抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)檢測(cè)試劑盒AT-Ⅲ ELISA Kit

載脂蛋白樣蛋白6抗體抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)檢測(cè)試劑盒AECA ELISA Kit

凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)檢測(cè)試劑盒ADH/VP/AVP ELISA Kit

A2LD1蛋白抗體抗酒石性磷5b(TRACP-5b)檢測(cè)試劑盒TRACP-5b ELISA Kit

α1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移α4Gn-T抗體抗酒石性磷5b(TRACP5b)檢測(cè)試劑盒TRACP5b ELISA Kit

芳香乙酰脫乙?？贵w抗酒石性磷(TRACP)檢測(cè)試劑盒TRACP ELISA Kit

芳香乙酰脫乙酰樣蛋白4抗體抗抗體(AsAb)檢測(cè)試劑盒AsAb ELISA Kit 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)