商品介紹:
Didanosine(Videx)是逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑,IC50為490nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):69655-05-6 別名:2,3-Dideoxyinosine;ddI 純度:97.98% 分子量:236.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Didanosine)
英文名稱:Didanosine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鷓鴣菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Alanyl-DL-norvalineHERC4 E3泛蛋白連接抗體包裝250mg
珍珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-(1-Naphthyl)-L-alanineHERC6 E3泛蛋白連接抗體包裝5g
珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanineMMF誘導(dǎo)片段蛋白1抗體包裝1g
正丁基酞;丁基酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Citrulline HERPUD蛋白家族成員2抗體包裝25g
正二十九烷英文名稱: Fmoc-L-Citrulline尿黑氧化抗體包裝5g
芝麻林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-β-homoalanine肝生長調(diào)節(jié)因子酪激底物抗體包裝1g
芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl esterT2識(shí)別黑色瘤抗原抗體包裝250mg
知母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-β-homoaspartic acid肝癌HHCM蛋白抗體包裝5g
知母皂苷A1英文名稱: Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester紫外切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23A抗體包裝1g
知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-HomoArg-OH紫外切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23B抗體包裝250mg
知母皂苷BII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Hydroxyproline3-羥基異丁脫氫抗體包裝100g
知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-HydroxyprolineHib乙酰解抗體包裝25g
梔子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Norleucine腫瘤異?;鞍?抗體包裝500g
蜘蛛香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH腫瘤異?;鞍?抗體包裝25mg
植(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,5-Diiodo-L-tyrosine缺氧誘導(dǎo)因子脯酰羥化4抗體包裝1g
乳乳球菌Lactococcus lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)流行性腦脊髓膜炎抗體試劑盒金合歡;Acacetin
克雷伯氏菌Klebsiella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感病抗體IgG試劑盒;D(-)-Tartaric ac
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98%流感B病抗體IgG ELISA Kit;Formic acid
逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Didanosine)抑癌因5抗體矢車菊黃 CENTAUREIDINE(RG)(PLEASE CALL)Human
腦腫瘤抑癌蛋白1抗體矢車菊黃 CENTAUREIDINE(RG)(PLEASE CALL)Human
肺癌抑癌蛋白1抗體訶子鞣 CHEBULAGIC ACID(RG)Human, Mouse, Rat
前列腺癌抑癌蛋白3抗體訶子鞣 CHEBULAGIC ACID(RG)Chicken
狀腺激受體α1抗體苦瓜甙 CHARANTIN(P)Human, Mouse, Rat
狀腺激受體α1+α2抗體苦瓜甙 CHARANTIN(P)Human, Mouse, Rat
脂滴相關(guān)蛋白TIP47抗體訶子林鞣 CHEBULINIC ACID(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
腫瘤抑制因Testin抗體訶子林鞣 CHEBULINIC ACID(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體母菊薁 CHAMAZULEN(RG)Human, Mouse, Rat