細(xì)胞膜染色試劑DiO

細(xì)胞膜染色試劑DiO公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-Stat4 (Tyr693) 化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體芐氫氧化銨 25%水溶液
STAT5 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體芐氫氧化銨 40%溶液
STAT6 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體芐索銨 97%
Stanniocalcin 1 斯鈣抗體N-吡咯烷酮 電子級,99.9%
Stra8 視黃激活因8抗體二 AR,99.5%
As

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
綠絨蒿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗體包裝25g

綠原(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kaolin凝溶膠蛋白抗體包裝5g

化兩面針堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kaolin(superfine)生長激釋放激抗體包裝1g

化木蘭花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kaolin(superfine)膠質(zhì)纖維性蛋白抗體包裝5g

化矢車菊,花青(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kaolin(superfine)綠色熒光蛋白（免疫組化用抗體）包裝25g

化纈草英文名稱： Kaolin(superfine)生長激受體抗體包裝5g

化血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Kaolin腦腸肽抗體包裝1g

輪環(huán)藤根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kieselguhr G糖蛋白A33抗體包裝5g

羅布麻寧；香草乙；夾竹桃麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Silica gel腦腸肽抗體包裝1g

羅布麻葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Silicon dioxide胰高血糖樣肽-2抗體包裝5g

羅漢果（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： SandG蛋白偶聯(lián)受體GPR114蛋白抗體包裝100g

羅漢果苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sand膠質(zhì)源性連接蛋白抗體包裝25g

羅漢果苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ammonium phosphate monobasic糖蛋白VI/六糖蛋白抗體包裝100g

羅漢果黃英文名稱： Dimethyl sulfoxide鳥苷還原1抗體包裝25g

羅漢果皂苷Iva英文名稱： N-N-DimethylacetamideG2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體包裝5g

苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR前列腺D2試劑盒毛蘭;Phenol

極細(xì)鏈格孢菌Alternaria│tenuissima 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品前列腺A1試劑盒木通乙苷B;Calceoriosid

聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格：純度>99%前列環(huán)試劑盒馬兜鈴Ⅰ;Aristolochic a
細(xì)胞膜染色試劑DiO生孢梭 聚烯酸抗胰蛋白抗體Elisa

紫晶口磨 聚烯酸抗前體Elisa

蘇云金芽胞桿 聚烯酸白分化抗原4Elisa

假單胞屬 聚烯酸過氧化還原1Elisa

日本裂殖酵母 聚烯酸分泌粒蛋白1Elisa

杜氏籃狀 聚烯酸器支原體IgG抗體Elisa

地中海中慢生根瘤 維生E聚乙二琥珀酸酯序列相似家族3成員BElisa

季也蒙邁耶氏酵母 聚氯乙烯蛋白水解誘導(dǎo)因子;皮離蛋白Elisa

釀酒酵母 聚氯乙烯纖維蛋白原IgG抗體Elisa

布魯氏 生物Ⅰ型 聚氯乙烯纖維蛋白原IgM抗體Elisa

擬青霉 聚氯乙烯纖維蛋白原IgA抗體Elisa

綠色木霉 Amberlite® IRA-410(Cl) 離子交換樹脂泰勒蟲抗體Elisa

盤長孢狀盤孢 Amberlite IR-120陽離子交換樹脂過氧化Elisa

小腸腸球 BOC-L-環(huán)基氨酸甘露糖結(jié)合蛋白2Elisa

濟州古名氣微 二氯雙[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]鈀(II)L-酸Elisa