商品介紹:
Testolactone是一種芳香酶抑制劑,是一種合成的抗腫瘤劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:968-93-4 純度:95.0% 分子量:300.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
大腸埃希氏菌Pseudomonas aeruginosa大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
可可鏈霉菌可可亞種Pseudomonas aeruginosa大鼠髓過氧化物(MPO)
生孢梭菌Pseudomonas aeruginosa大鼠髓過氧化物(MPO)
蘋果雙殼菌Pseudomonas aeruginosa大鼠顆粒B(Gzms-B)
嗜果刀孢Pseudomonas alcaligenes大鼠顆粒B(Gzms-B)
腸膜明串珠菌Pseudomonas alcaligenes大鼠顆粒A(Gzms-A)
Cellulomonas carbonisPseudomonas alcaligenes大鼠顆粒A(Gzms-A)
黃暗青霉Pseudomonas alcaligenes大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
釀酒酵母Pseudomonas aeruginosa大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)
紡錘形毛殼Pseudomonas alcaligenes大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)
平田頭菇10-3Pseudomonas alcaligenes大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)
大腸埃希氏菌Pseudomonas alcaligenes大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)
圍小叢殼菌Pseudomonas anguilliseptica大鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)
斯氏普羅威登斯菌Pseudomonas alcaligenes大鼠腎(Renin)
華根霉Pseudomonas chlororaphis大鼠腎(Renin)
耐熱錢斯氏酵母Pseudomonas chlororaphis大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
帕金蛋白抗體鐮刀菌人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)(干細(xì)胞庫保藏)
粘著斑激抗體橙色串珠霉人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)(干細(xì)胞庫保藏)
P73腫瘤抑制基因抗體產(chǎn)氮假單胞菌超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)
配對盒基因7抗體膠狀溶桿菌基轉(zhuǎn)移(ALT/GPT)比色法測試盒(賴氏法)
芳香酶抑制劑(Testolactone)魯氏接合酵母 烯葡聚糖凝膠S-100 HR
猴頭 高烏甲
大腸埃希氏 瓊脂糖凝膠CL-2B
土壤谷桿 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)
煙灰褐絲膜 長春新堿
聚紅粉端孢霉 瓊脂糖凝膠CL-4B
類芽胞桿 硫酸長春新堿
釀酒酵母 瓊脂糖凝膠CL-6B
節(jié)桿 硫酸長春質(zhì)堿
解脂假絲酵母 瓊脂糖凝膠6FF
枯草芽孢桿 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂
氟乙酰速測管 肝瓊脂糖凝膠6FF
地衣芽孢桿(備貨期15到25個工作日) 長春質(zhì)堿
土曲霉 紅色瓊脂糖凝膠6FF
解藻酸弧 長春堿