UHRF1抑制劑(NSC232003)

公司產品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

產品屬性：

中文名稱：UHRF1抑制劑(NSC232003)

英文名稱：NSC232003

產品規(guī)格：1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

金黃殼囊孢菌Brevibacillus laterosporus兔補體蛋白3(C3)

米根霉Achromobacter denitrificans兔p物質(SP)

牛蛙假絲酵母Achromobacter denitrificans兔p物質(SP)

圖爾正青霉Mycobacterium smegmatis兔子層連蛋白/板層(LN)

棕黑腐質霉Lactobacillus animalis兔子層連蛋白/板層(LN)

季也蒙邁耶氏酵母Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii兔(cAMP)

固氮菌Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis兔(cAMP)

樹脂殼菌Lactobacillus murinus兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

黃桿菌屬Enterococcus faecalis兔血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

云南木霉Haloferax mediterranei兔血管內皮生長因子(VEGF)

蠟葉曲霉Halorubrum saccharovorum兔血管內皮生長因子(VEGF)

pET-39bNatrinema altunense兔骨橋(OPN)

假單胞菌屬Natrinema altunense兔骨橋(OPN)

乳桿菌屬Natrinema altunense兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)

費比恩塞伯林德納氏酵母Natrinema altunense兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)

綠粘帚霉Natrinema altunense兔血清總補體(CH50)

甲狀腺過氧化物抗體乙酰微小桿菌(乙酰短桿菌)Prauserella rugosa

血小板生成/巨核細胞集落刺激因子抗體爭論貪噬菌鏈霉菌屬菌種

辣椒受體5抗體柱狀黃桿菌Actinomadura oligospora

腫瘤排斥抗原gp961變異體抗體阿姆斯特丹散囊菌Arthrobacter oryzae
UHRF1抑制劑(NSC232003)沉積物萊西氏 異檸檬酸脫氫

吉林兼性芽孢桿 纖維透析袋（5000）

山茶 漆

釀酒酵母 (+)-兒茶

假單胞屬 3-磷酸甘油酸激

鼻疽伯克霍爾德氏 纖維透析袋（5000）

吸水鏈霉紫色變種 甘油-3-磷酸脫氫

清酒假絲酵母 纖維透析袋（10000）

果生核盤 胡黃連苷III

弗雷德里克斯堡假單胞 胡黃連苷II