以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CaCC抑制劑(CaCCinh-A01) | CaCCinh-A01 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
CaCCinh-A01是TMEM16A和鈣激活氯化物通道(CaCC)的抑制劑,IC50值分別為2.1和10μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:407587-33-1 純度:99.60% 分子量:347.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
脂1(LPIN1)ELISA Kit英文名稱:LPIN1 ELISA KitBRPF3蛋白抗體包裝5g
脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)ELISA Kit英文名稱:ADIPOR1 ELISA KitBXDC1蛋白抗體包裝25g
脂解激活脂蛋白受體(LSR)ELISA Kit英文名稱:LSR ELISA Kit腦蛋白44抗體包裝5g
脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA Kit英文名稱:FABP4 ELISA Kit腦蛋白44樣蛋白抗體包裝250mg
脂肪合(FASN)ELISA Kit英文名稱:FASN ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣2抗體包裝1g
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA Kit英文名稱:LBP ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣8抗體包裝5g
脂多糖(LPS)ELISA Kit英文名稱:LPS ELISA Kit嗜乳脂蛋白樣9抗體包裝10MG
脂蛋白脂(LIPD)ELISA Kit英文名稱:LIPD ELISA KitBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝1g
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂A2(LpPLA2)ELISA Kit英文名稱:LpPLA2 ELISA Kit腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體包裝25g
脂蛋白a(Lpa)ELISA Kit英文名稱:Lpa ELISA KitBcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5g
整合β3(ITGβ3)ELISA Kit英文名稱:ITGβ3 ELISA Kit腦環(huán)核苷門控通道蛋白1抗體包裝25g
整合αM(ITGαM)ELISA Kit英文名稱:ITGαM ELISA Kit癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體包裝5g
整合α3(ITGα3)ELISA Kit英文名稱:ITGα3 ELISA Kit紡錘體檢查點蛋白抗體包裝1g
整合α1(ITGα1)ELISA Kit英文名稱:ITGα1 ELISA Kit有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體包裝5g
真核翻譯起始因子2α激3(EIF2αK3)ELISA Kit英文名稱:EIF2αK3 ELISA Kit癌相關(guān)蛋白3抗體包裝5mg
整合樣金屬蛋白與凝血樣1蛋白抗體肌肉生長抑制(MSTN)BMS-911543 是一種選擇性的 JAK2 抑制劑,IC50 值為 1.1 nM,對 JAK1,JAK3 和 TYK2 的選擇性相對較弱,IC50 值分別為
CaCC抑制劑(CaCCinh-A01)四氟鈉
四氫鋁鈉
四亞二硫代鈉
式亞硫鈉
性硫鈉
鈦鈉
頭孢噻肟鈉
脫氧核糖核鈉
無水卑磷鈉