PFKFB3抑制劑(PFK-015)

PFKFB3抑制劑(PFK-015)公司*的產(chǎn)品：Mre11/HNGS1/FITC 熒光標(biāo)記DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG3-酰氧-2-丁酮 98%
Phospho-Mre11 (Ser676)/FITC 熒光標(biāo)記化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體IgG4-酰氧-2, 5-二 -3-酮 98%
MRP1/FITC 熒光標(biāo)記多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體IgG黑胡椒油 食品級
CITED

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PFKFB3抑制劑(PFK-015)

英文名稱：PFK-015

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

凍干粉  志賀氏菌（陰性） 人磷甘油變位2Bacillus cereus小鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)

爪哇根霉人前列腺D合成Bacillus cereus小鼠活化A(ACV-A)

黑曲霉人肽酰脯酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1Bacillus cereus小鼠活化A(ACV-A)

釀酒酵母人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3Bacillus cereus小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)

寄生孢人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化Bacillus cereus小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)

釀酒酵母人抑肽Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)

球孢白僵菌人胱天蛋白12Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)

平菇2180人蛋白激ABacillus cereus小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)

香菇人解整合樣金屬蛋白10Bacillus cereus小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)

志賀氏菌人基質(zhì)金屬蛋白11Bacillus cereus小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)

孢囊放線菌人胸苷合成Bacillus cereus小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)

寡營養(yǎng)單胞菌屬人胸腺嘧啶核苷磷化Bacillus cereus小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)

交織頂孢霉人多聚ADP核糖聚合Bacillus cereus小鼠巨噬炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)

匍枝根霉(黑根霉)人葡萄糖激Bacillus cereus小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)

轉(zhuǎn)化人參皂苷鞘單胞菌人單氧化Bacillus cereus小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)

旋渦混合器 (便攜式)人胞漿型磷脂A2Bacillus cereus小鼠溶菌(LZM)

Wnt蛋白家族7B抗體蘇云金芽孢桿菌阿萊亞種倉鼠腎成纖維細(xì)胞

WASF2抗體蘇云金芽孢桿菌科爾默亞種大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞

WNT蛋白家族Wnt8b抗體野油菜黃單胞菌核桃致綿羊睪丸上皮細(xì)胞（原代）

色豐富蛋白抗體丁香假單胞菌流洄致病變種大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞
PFKFB3抑制劑(PFK-015)枯草芽孢桿 2-金剛烷酮

銹褐蠟黃鏈霉 2-金剛烷

腐霉 3'-甲氧基葛根

硬結(jié)節(jié)桿 金剛烷

枯草芽孢桿 己烯雌

高優(yōu)抗(平菇) 含羞草

盤長孢狀盤孢 鄰菲啰啉

枯草芽孢桿 胡桃醌

Bacillus  間甲基紅

沙雷氏屬 灰氈毛忍冬皂苷甲

金頂側(cè)耳 海藻糖

戊糖乳桿 鉻藍(lán)黑R

弗氏鏈霉 紅鏈霉-龍膽二糖苷

門柏青霉 鉻黑T

青霉屬 決明