鞭毛染色液(改良Ryu法)

鞭毛染色液(改良Ryu法)公司正在出售的產(chǎn)品：IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光標(biāo)記白介-5受體α鏈抗體IgG異丁 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
IL-6/FITC 熒光標(biāo)記白介6抗體IgG二四鋅二鈉 四水合物 用于絡(luò)合, ≥98%
IL-6/FITC (mouse、rat) 熒光標(biāo)記白介6抗體IgG硅藻土G TLC
IL-6/FITC 熒光

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
替加英文名稱(chēng)： Naphthalene-1,5-disulfonic acid disodium salt前列腺EP1受體抗體包裝500g

替拉扎明英文名稱(chēng)： Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate脯解4抗體包裝1g

替諾昔康英文名稱(chēng)： Naphthol AS acetate性核磷蛋白32家族B抗體包裝100g

咯英文名稱(chēng)： NCS, N-Chlorosuccinimide程序性死亡2樣抗體包裝25g

咯丁三英文名稱(chēng)： n-Dodecyl-b-D-thiomaltoside豬藍(lán)耳病病M蛋白抗體包裝100g

洛芬英文名稱(chēng)： NDSB 256蛋白體PSMα3抗體包裝25g

色林,凱他色林英文名稱(chēng)： NDSB-211蛋白體PRS10B抗體包裝5g

托吡酯英文名稱(chēng)： Neutral red solution(1X)蛋白體PSMD3抗體包裝5MG

托伐普坦英文名稱(chēng)： Nickel powder腦蛋白4抗體包裝1g

托拉塞米英文名稱(chēng)： Nile blue A磷化蛋白體PSMα3抗體包裝100g

托萘酯英文名稱(chēng)： N-Iodosuccinimide抑癌蛋白DLP1包裝25g

托曲珠利;妥曲珠利英文名稱(chēng)： N-N-Dimethylglycine hydrochloride蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移1抗體包裝500g

脫羧雷他定/地雷他定英文名稱(chēng)： n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激1β/CaMKIβ抗體包裝2g

英文名稱(chēng)： n-Octyl-b-D-maltopyranoside激-M2抗體包裝25g

維拉佐英文名稱(chēng)： Nonyl β-D-glucopyranoside原鈣粘蛋白β7抗體包裝5g

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,合成核黃激試劑盒澳洲茄;solasodine

亞鐵氧化硫桿狀菌Acidithiobacillus│ferrooxidans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品和肽試劑盒澳洲茄邊堿;solamargine

: ivcas7.00562資源名稱(chēng): 多粘類(lèi)芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：40%,BR漢坦病試劑盒澳洲茄堿;Solasonine
鞭毛染色液(改良Ryu法)膠紅酵母 叔丁基對(duì)苯醌半胱氨酰白三烯1型受體Elisa

產(chǎn)黃青霉 1-[2-(2-羥基乙氧基)乙基]N-甲基-D-天冬氨酸Elisa

腐皮鐮孢 5--3-羧酸甲酯白介36Elisa

魯氏不動(dòng)桿 3--4-α1抗胰蛋白Elisa

亮白曲霉 2-三氟甲基環(huán)氧乙烷14,15-環(huán)氧化二十碳三烯酸Elisa

微紫青霉 氟乙?；駿lisa

賈巴爾普爾毛殼 N-芐氧羰基-DL-纈氨酸過(guò)氧化物Elisa

深綠木霉 3--4-羥基三氟甲苯日本腦炎病IgG抗體Elisa

亞大韌革 3,5-二甲基(順?lè)串悩?gòu)體混和物)脂酰合成Elisa

橘橙色動(dòng)球 2-氨基-5-磺基增殖誘導(dǎo)配體Elisa

香乳菇 八氟甲基烯酸戊酯表皮生長(zhǎng)因子受體Elisa

鉤狀木霉 孟布酮黑色Elisa

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 3-甲氧基-4-胎球蛋白AElisa

米根霉 1-甲基-2-吡咯烷甲結(jié)合珠蛋白Elisa

根瘤 全氟己基烷β-防御Elisa