以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
BET家族抑制劑(Mivebresib) | Mivebresib | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Mivebresib是BET家族的抑制劑,能夠擾亂關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄程序在體內(nèi)或者體外推動(dòng)前列腺癌增長(zhǎng)引起強(qiáng)的抗腫瘤特性,也是MYC和TMPRSS2-ETS的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1445993-26-9 別名:ABBV-075 純度:99.28% 分子量:459.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌干擾調(diào)節(jié)因子4抗體Human RBM15B ELISA Kit中心體蛋白350kDa(CEP350)
鏈霉菌胰島樣生長(zhǎng)因子1受體β/IGF-IRβ 抗體Human RASSF6 ELISA Kit中期因子(MK)
根瘤桿菌屬ING4抗體Human RASSF8 ELISA Kit制瘤M受體(OSMR)
米曲霉大鼠血清型IgA抗體Human RBM16 ELISA Kit酯酰甘油激ζ(DGKZ)
薩氏艾美耳球蟲(chóng)白介-17F抗體Human RB1CC1 ELISA Kit脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)
平菇胰島生長(zhǎng)因子樣家族成員1抗體Human RASSF7 ELISA Kit脂氧A4(LXA4)
不解糖鞘單胞菌白介-17C抗體Human RANBP6 ELISA Kit脂磷壁(LTA)
擴(kuò)展青霉中介抗體Human RAP2B ELISA Kit脂聯(lián)受體2(ADIPOR2)
斐濟(jì)球腔菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human RAP1B(Ras-related protein Rap-1b) ELISA Kit脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)
鼠李糖乳桿菌干擾調(diào)節(jié)因子6抗體Human RAP2A ELISA Kit脂聯(lián)(ADT)
紅色紅曲Human RAP1GAP ELISA Kit脂聯(lián)(ADP)
阿穆?tīng)査箍藶雏}地桿菌胰島生長(zhǎng)因子樣家族成員4抗體Human RBM16 ELISA Kit脂肪脂肪結(jié)合蛋白(aFABP)
柴油食烷菌白介31抗體Human RAPGEF5 ELISA Kit脂肪型脂肪結(jié)合蛋白(aFABP)
金孢霉屬干擾誘導(dǎo)蛋白P78抗體Human RAPH1 ELISA Kit脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)
淺紫灰直絲鏈霉菌抑制α/Inhibin α抗體Human RAPGEFL1 ELISA Kit脂肪結(jié)合蛋白4(FABP-4)
枯草芽孢桿菌枯草亞種白介18抗體Human RAPSN ELISA Kit脂肪結(jié)合蛋白(FABP)
: ivcas7.00857資源名稱(chēng): 凝結(jié)芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(R型)人參皂苷Rg2
日本根霉Rhizopus│japonicus 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)莫諾苷
解纖維芽孢桿菌Bacillus│cellulosilyticus 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)山茱萸苷
BET家族抑制劑(Mivebresib)大腸埃希氏 環(huán)辛烯腹瀉病抗體Elisa
糙皮側(cè)耳 5-氮胞嘧啶血吸蟲(chóng)抗體Elisa
美洲彎孢霉 (3,4-二甲氧苯基)乙膽固Elisa
產(chǎn)堿假單胞 環(huán)己基溴化鎂炭疽桿抗體Elisa
毛榛畢赤酵母 2-甲氧基萘炭疽桿Elisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 1-甲基吡唑腸激Elisa
芬氏鏈霉 Fmoc-L-酪氨酸巴氏桿抗原Elisa
香菇15 對(duì)三聯(lián)苯氣腫疽抗體Elisa
大腸埃希 4-苯基氣腫疽抗原Elisa
污泥根瘤 聯(lián)苯單乙酮血清白蛋白Elisa
枯草芽孢桿 1,5-戊二硫病性腹瀉病Elisa
立枯絲核 噻蒽呼腸孤病Elisa
腐皮殼 4--1-丁口蹄疫抗體Elisa
棘孢小單孢 3-丁炔-1-偽狂犬病抗體Elisa
Arenibacter sp. 2-溴乙基乙酸酯鈣衛(wèi)蛋白Elisa