公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Mps1激酶抑制劑(BAY 1161909)
英文名稱:BAY 1161909
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BAY1161909抑制Mps1激酶活性,10μM ATP條件下測得IC50<1nM,2mM ATP條件下,測得IC50<1.9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1443763-60-7 純度:98.0% 分子量:559.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
綠粘帚霉動物RNAout(快速動物總RNA提取試劑)Escherichia coli小鼠促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)
芽孢桿菌植物RNAout(植物RNA提取試劑)Escherichia coli小鼠胰島受體β(ISR-β)
白假絲酵母血液RNAout(血液總RNA提取試劑)Escherichia coli小鼠胰島受體β(ISR-β)
赤紅球菌病RNAout(病RNA提取試劑)Escherichia coli小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)
小單孢菌細菌RNA提取試劑Escherichia coli小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)
鏈格孢菌RNAin(凍型RNA樣品保存液)Escherichia coli小鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
黃曲霉總RNA提取試劑Escherichia coli小鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)液體樣品RNA提取試劑Escherichia coli小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
Bacillus anthracis RNA高效保存液Escherichia coli小鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
枯草芽胞桿菌(黑色變種)植物RNA提取的試劑Escherichia coli小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)
金龜子綠僵菌RNAon(即用型RNA變性上樣液)Escherichia coli小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)
白黃鏈霉菌RNAsharp(RNA電泳帶銳化劑)Escherichia coli小鼠透明質(zhì)(HA)
生暗灰鏈霉菌蛋白抽提試劑盒-I (實體組織和蛋白抽提)Escherichia coli小鼠透明質(zhì)(HA)
大豆慢生根瘤菌蛋白抽提試劑盒-II (液體樣品蛋白抽提和回收)Escherichia coli小鼠胰高血糖樣肽1(GLP-1)
Lonsdalea quercina subsp. quercina核-胞漿蛋白制備試劑盒 (Nuclear-Cytosol Extraction Kit)Escherichia coli小鼠胰高血糖樣肽1(GLP-1)
芥黃蜜環(huán)菌伊紅 Y(Eosin Y Sodium)Escherichia coli小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
癌/睪丸抗原58抗體煙草鐮刀菌鼬肺上皮細胞
NADPH氧化4抗體印度肯德座霉SV40轉(zhuǎn)化的洲綠猴腎細胞(干細胞庫保藏)
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體禾谷昆明白小鼠胚胎成纖維細胞,經(jīng)mitomycin-C處理,P3,300萬細胞(干細胞庫保藏)
核干細胞因子抗體鳥核苷結(jié)合蛋白3木賊鐮刀菌昆明白小鼠胚胎成纖維細胞,經(jīng)射線處理,P3,100萬細胞(干細胞庫保藏)
Mps1激酶抑制劑(BAY 1161909)金孢寄生 α-細辛腦
大腸埃希氏 L-茶
蒼黃鏈霉 伐他
雅致枝霉 雙醋瑞因
猴頭 強力霉
嬰兒配方乳粉 牛磺酸 毛兩面針
芒果土賴芽胞桿 MH肉湯(MHB)
鹽晶嗜冷桿 、鈉/K, Na
平臍蠕孢 羧甲基纖維
黑曲霉 甲基異茜草
細鏈格孢 長春瑞濱
費比恩畢赤酵母 脫水長春堿
草酸青霉 硫酸長春堿
白色短波單胞 降二氫辣椒堿
松生擬層孔* 馬兜鈴內(nèi)酰A