PDE3抑制劑（Pimobendan）

PDE3抑制劑（Pimobendan）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-LH/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人促黃體生成素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-STAT4 /FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AF10/MLLT10 髓

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大葉紫珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bromophenol red, sodium saltFAM153B蛋白抗體包裝5g

大棗（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Butyl stearateFAM46C蛋白抗體包裝25ml

大皂角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C10E6舌癌耐藥相關(guān)蛋白1包裝1g

玳瑁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C12E10FAM129B蛋白抗體包裝5g

丹參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： C12E9微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝1g

丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium chloride, anhydrousFAM50A蛋白抗體包裝5g

丹參鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxalate, monohydrateFAM113A蛋白抗體包裝5mg

丹參IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxide (Lime) powderFAM150A蛋白抗體包裝25ml

丹參IIA-磺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Calcium oxide lumpFRMD8蛋白抗體包裝5ml

丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium phosphate, monobasic, monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白抗體包裝1g

丹酚A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium pyrophosphateFAM家族蛋白40A抗體包裝5g

丹酚B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Canada balsamFAM55D蛋白抗體包裝1g

丹酚B二酯英文名稱： Caprolactam組織激活過氧化活化增生受體γ蛋白抗體包裝25g

丹酚C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Carboxypeptidase YFAM21C蛋白抗體包裝5g

丹酚D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Castor oilFAM13C1蛋白抗體包裝1g

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR神經(jīng)粘附分子配體1試劑盒去氫吳茱萸堿;Dehydroevodia

豬霍亂沙門氏菌Salmonella│choleraesuis 質(zhì)量規(guī)格：BR神經(jīng)特異性烯化試劑盒去澤拉木 ;Demethylzeyl

季氏畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格：>98%，進(jìn)口分裝神經(jīng)肽Nesfatin-1 ELISA Kit13-去羥基印烏堿 ; 13-Dehyd
PDE3抑制劑（Pimobendan）胸腺質(zhì)淋巴生成-1抗體(人)鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human, Mouse, Rat

狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human, Mouse

微管蛋白α/Tubulin α抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(SH)Human

三狀腺T3抗體二鹽小檗 BERBAMINE DIHYDROCHLORIDE(RG)Human

腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體二鹽小檗 BERBAMINE DIHYDROCHLORIDE(RG)Human, Mouse, Rat

促狀腺受體抗體（N端）硫芐酯 BENZYL THIOCYANATE(SG)Human, Mouse, Rat

狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體酰-(2R,3S)-3-異絲酯(紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE METHYLESTER,N-(P)Human, Mouse

轉(zhuǎn)鈷蛋白2抗體酰-(2R,3S)-3-異絲酯(紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE METHYLESTER,N-(P)Human, Mouse, Rat

跨膜蛋白74抗體(2R,3S)-3-(酰)-2-羥乙酯 (紫杉側(cè)鏈) BENZYLOXYPHENYLISOSERINE ETHYLESTER,N-(P)Human, Mouse