公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:腫瘤相關(guān)突變體IDH2R140Q抑制劑(AGI-6780)
英文名稱:AGI-6780
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AGI-6780有效且選擇性抑制腫瘤相關(guān)突變體IDH2R140Q,IC50為23±1.7nM。AGI-6780對(duì)IDH2WT的作用效果微弱,IC50為190±8.1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1432660-47-3 純度:95.49% 分子量:481.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
香菇Pseudomonas chlororaphis大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
枯草芽孢桿菌枯草亞種Pseudomonas chlororaphis大鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)
微球菌Pseudomonas azotoformans大鼠抗內(nèi)皮抗體(AECA)
馬勃狀硬皮馬勃Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)
擬隱孢殼屬Pseudomonas chlororaphis大鼠全段甲狀旁腺(i-PTH)
炭疽芽胞桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)
雜17Pseudomonas chlororaphis大鼠牛小腸堿性磷(CIAP)
類諾氏菌屬Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)
深褐芽孢桿菌Pseudomonas chlororaphis大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)
華農(nóng)產(chǎn)黃細(xì)菌Pseudomonas cichorii大鼠克蛋白(CC16)
豬肺炎支原體(可訂購(gòu))Pseudomonas chlororophis大鼠克蛋白(CC16)
土生叢毛單胞菌Pseudomonas cichorii大鼠腎上腺(EPI)
假單胞菌Pseudomonas chlororophis大鼠腎上腺(EPI)
靈芝Pseudomonas cichorii大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
總狀毛霉Pseudomonas corrugata大鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)
假長(zhǎng)雙歧桿菌假長(zhǎng)亞種Pseudomonas corrugata大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)
piwi樣1蛋白抗體檸檬色短小桿菌性磷(ACP)比色法測(cè)試盒
血小板源性生長(zhǎng)因子-B抗體蠟質(zhì)芽孢桿菌堿性磷(ALP)比色法測(cè)試盒
血小板源性生長(zhǎng)因子受體A抗體PDGFRα淀粉液化芽孢桿菌肌激(CK)比色法測(cè)試盒
色上皮源性因子抗體冬青節(jié)桿菌氫-鉀ATP比色法測(cè)試盒
腫瘤相關(guān)突變體IDH2R140Q抑制劑(AGI-6780)根瘤 藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF
頂青霉 苯基瓊脂糖凝膠6FF(高分辨率)
Massilia 長(zhǎng)春瑞濱
苯基瓊脂糖凝膠CL-4B
長(zhǎng)枝木霉 甘油三油酸酯
葡萄座腔 苯基瓊脂糖凝膠6FF(低分辨率)
橙單胞屬 鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF
球孢白僵 平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)
里亞氏須腹 SP瓊脂糖凝膠FF
黃傘(黃柳菇) 路路通內(nèi)酯
水稻彎孢 羧甲基瓊脂糖凝膠CL-6B
假灰鏈霉 28-去甲基-β-香樹脂酮
黑根霉 Q瓊脂糖凝膠FF
糞腸球 DEAE瓊脂糖凝膠FF
變灰青霉 巖大戟內(nèi)酯B