商品介紹:
Buserelin(INN)Acetate是一個(gè)GnRH的激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):68630-75-1 純度:99.98% 分子量:1299.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 ,英文名: HIS ELISA Kit
小鼠凝Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA檢測(cè)試劑盒MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 96T/48T
人抗白蛋白抗體(AAA)免疫試劑盒 Human ai-albumin aibody,AAA ELISA Kit
RabbitoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit兔肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞ERBETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA試劑盒人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素22(IL22)ELISA試劑盒 ,英文名: IL22 ELISA Kit
人催乳素(PRL)ELISA檢測(cè)試劑盒humanprolactin,PRLELISAKit 96T/48T
大鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒 Rat ai-IVIgG aibody ELISA Kit
英文名稱RatmalondialchehycheELISAKit大鼠丙二(MDA)規(guī)格:96T/48T
酒類抗壞血酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitHc人溶血補(bǔ)體規(guī)格:48T/96T
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit 兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforai-Q-Ab(Humanai-Qfeveraibody)ELISAKit人抗Q熱抗體規(guī)格:48T/96T
血液3-羥-3-甲戊二酰HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineInfluenzavirusesA,FLUAELISAKit豬流感病毒A(FLUA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
GnRH激動(dòng)劑(Buserelin Acetate)ZBTB46 英文名稱: 鋅指蛋白340抗體 0.2ml
DIS3 英文名稱: 有絲分裂控制蛋白dis3抗體 0.2ml
膜粘連蛋白 VI抗體 Anti-Annexin VI 0.1ml
Anti-Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1/2(Thr202/Tyr204)( p44/42 MAPK) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.2ml
DDB2(DNA damage-binding protein 2) 損傷DNA結(jié)合蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg