商品介紹:
EI1是一種新穎的,有效的EZH2抑制劑,能夠作用于EZH2(WT)和EZH2(Y641F),IC50值分別為15nM和13nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1418308-27-6 別名:Ezh2 inhibitor 純度:96.34% 分子量:390.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
EZH2抑制劑(EI1) | EI1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
新月彎孢Anti-HNRNPA0 pAb人抗肌動蛋白抗體(AAA)
長孢鏈霉菌Anti-hnRNP L Antibody人抗肌動蛋白抗體(AAA)
黃絮鱗鵝膏菌Anti-HNRNPD Antibody人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)
運動替斯崔納菌Anti-HNRNPC Antibody人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體(HIT)
水棲黃桿菌Anti-HNRNPD Antibody人蛋白3抗體(PR3Ab)
檸檬色短小桿菌Anti-HNRNPD(AUF1) pAb人蛋白3抗體(PR3Ab)
葡萄座腔菌Anti-HNRNPM Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)
緣彎孢Anti-HNRNPH1 Antibody人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)
木糖氧化無色桿菌Alexa Fluor 350標記兔IgG(流式同型對照)Anti-HNRNPH2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
牛病性腹瀉病熒光Cy3標記兔抗FITCAnti-HNRNPLL Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
異常漢遜酵母熒光PE-Cy3標記小鼠IgG(流式同型對照)Anti-HORMAD1 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
枯草芽孢桿菌熒光PE-Cy3標記羊IgG(流式同型對照)Anti-HNRNPUL2 Antibody人β乳糖蛋白抗體IgG
球形芽胞桿菌熒光Cy3標記羊抗人IgAAnti-HNRNPUL2 Antibody人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)
多主葡萄殼菌Alexa Fluor 350標記羊IgG(流式同型對照)Anti-HOXA7 Antibody人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)
土曲霉Alexa Fluor 350標記大鼠IgG(流式同型對照)Anti-HNRPLL Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)
伊氏斯特氏菌生物標記牛血清白蛋白Anti-HOXB1 Antibody人抗糖蛋白抗體(GP)
PSD95結(jié)合蛋白2抗體產(chǎn)黃青霉人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞
PSD95結(jié)合蛋白4抗體阿達青霉人胰腺癌細胞系
SCK蛋白抗體棉鈴蟲擬青霉大鼠甲狀腺細胞
神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白2抗體玫煙色擬青霉彌漫大B細胞淋巴瘤細胞
EZH2抑制劑(EI1)中慢生根瘤 5-二十三基-1,3-苯二
蠟狀芽孢桿 5-Methoxy-2',3'-dehydromarmesin
黑曲霉 5-羥基-7-乙酰氧基-8-甲氧基黃酮
丁香假單胞 5-羥基-4-甲氧基鐵屎米酮
大毛霉 5-Hydroxy-2-pyrrolidinone
陰溝腸桿 5-Hydroxy-1,7-diphenyl-6-hepten-
慢生新鞘氨 5-Epilithospermoside
變灰青霉 5,19-Epoxy-19,25- dimethoxycucur
蘑菇2796 5-(Z-十七-8-烯基)鄰苯二
pGADT7 AD 4'-羥基漢黃芩
米根霉 4-Hydroxycinnamamide
河生雷勒特氏 4-羥基-2,6,6-基-1-環(huán)己烯羧酸
羅倫隱球酵母 4-表可木酸
Cystofilobasidium 4,5-二甲氧基鐵屎米酮
局限青霉 5,4-二羥基-6,7,3,5-四甲氧基黃酮