鞭毛染色液(Leifson法)

鞭毛染色液(Leifson法)公司*的產(chǎn)品：IL-12R Beta1/CD212/FITC 熒光標(biāo)記白介-12受體β1抗體IgG亞藍(lán) Indicator
IL-12R Beta2/FITC 熒光標(biāo)記白介-12受體β2抗體IgG紫脲銨 IND
IL-13/FITC 熒光標(biāo)記白介13抗體IgG酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.9%（GC)
IL-13Ra1/FITC 熒光標(biāo)記白介-13受體a1抗體

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：鞭毛染色液(Leifson法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：3×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

鹽英文名稱： Penitrem A from Penicillium palitans胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體包裝5g

鹽阿扎司瓊英文名稱： Pentaacetyl-β-D-galactopyranose蛋白酪磷PTPσ抗體包裝5MG

英文名稱： PermutitETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體包裝1g

(進(jìn)口)英文名稱： Phenolphthalein diphosphate tetrasodium salt神經(jīng)叢蛋白A3抗體包裝25g

鹽溴索英文名稱： Phenothiazine磷化蛋白酪磷1C抗體包裝1g

鹽奧布英文名稱： Phenoxyaceti acid sodium salt絲/蘇蛋白磷4C抗體包裝25g

鹽奧洛他定英文名稱： Phenyl salicylate神經(jīng)元PAS結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝5g

鹽貝那替英文名稱： Phospholipase A2 from Crotalus adamanteus Venom蛋白酪磷受體PCPTP1抗體包裝1g

鹽倍他司汀英文名稱： p-Hydroxybenzoic acid butyl ester sodium salt植烷酰羥化2相互作用蛋白抗體包裝25g

鹽海拉明英文名稱： p-Hydroxybenzoic acid ethyl ester sodium salt旁瘤抗原MA1抗體包裝5g

鹽海索英文名稱： p-Hydroxybenzoic acid methyl ester sodium salt大腦蛋白1抗體包裝1g

鹽芐達(dá)明英文名稱： p-Hydroxybenzoic acid propyl ester sodium salt核糖核結(jié)合蛋白2抗體包裝25g

鹽卡巴肼/鹽基芐肼英文名稱： Pimelic acid磷化過氧化活化增生受體γ抗體 PPARγ包裝5g

鹽卡特羅英文名稱： Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex早老蛋白1+2抗體包裝25g

鹽美英文名稱： Polypropylene glycol 2000豬藍(lán)耳病病抗體包裝5g

紅色擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥94.50%,標(biāo)準(zhǔn)品含patatin樣磷脂域3試劑盒阿魏松柏酯;coniferyl fer

: DSM1ATCC7050CCM2013NCIB9365NCTC10334資源名稱: 凝結(jié)芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品過氧化脂質(zhì)試劑盒松;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

Streptococcus dentirousetti模式菌株: 未知 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR過氧化物體增殖物激活受體α試劑盒磺惡唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鞭毛染色液(Leifson法)棒形小克銀漢霉 4-羥基-6-甲基嘧啶5-羥色受體2CElisa

芽胞桿 2-氟-3-甲氧基苯酸5-羥色受體3Elisa

葡萄酒  總二氧化硫、檸檬酸 4,4-二氟乙酰乙酸乙酯金黃色葡萄球腸BElisa

擬莖點霉 4-氟芐二氫還原Elisa

釀酒酵母 壬烷磺酸鈉早期分泌抗原靶6Elisa

煙色紅曲 順式-3-甲基丁酸-3-己烯酯二氫還原Elisa

枯草芽孢桿 3-氟-4-甲氧基苯甲超氧化物歧化Elisa

膠孢 2,4,5-三氟過氧化物Elisa

米曲霉 4'-溴-3'-氟乙酰苯一氧化碳血紅蛋白Elisa

類馬鏈球 2,4-二甲酯凝血原Elisa

栗疫 4-溴-2-苯磺B-趨化因子1Elisa

大腸埃希氏 4-溴-3-氟苯磺酰白三烯C4Elisa

膠凍樣芽孢桿 2-溴-4-氟苯磺酰25羥基維生DElisa

香菇 4-乙炔基苯乙二酰Elisa

根瘤 (S)-3-甲基嗎啉肝結(jié)合蛋白Elisa