多靶點(diǎn)激酶抑制劑（ENMD-2076 Tartrate）

多靶點(diǎn)激酶抑制劑（ENMD-2076 Tartrate）公司*的產(chǎn)品：DHT ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AD7C/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fbxw7/CDC4 Fbxw7蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
T

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：多靶點(diǎn)激酶抑制劑（ENMD-2076 Tartrate）

英文名稱：ENMD-2076 Tartrate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

球托霉菌屬w5菌株P(guān)aracoccus denitrificans兔子神經(jīng)生長因子(NGF)

庫德里阿茲威氏畢赤酵母Alcaligenes faecalis subsp. faecalis兔子脫氫表雄硫酯(DHEA-S)

枯草芽孢桿菌Pseudoalteromonas citrea兔子脫氫表雄硫酯(DHEA-S)

釀酒酵母Pseudoalteromonas atlantica兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)

木霉（加詞待譯）Pseudoalteromonas carrageenovora兔子髓磷脂堿性蛋白(MBP)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌Lactobacillus acidophilus兔子前列腺E2(PGE2)

龍勝鏈霉菌Lactobacillus acidophilus兔子前列腺E2(PGE2)

植物乳桿菌Streptococcus thermophilus兔子前列腺E1(PGE1)

Aurantimonas altamirensisHalorubrum saccharovorum兔子前列腺E1(PGE1)

腸桿菌Halorubrum lacusprofundi兔子皮質(zhì)/腎上腺(CORT)

牛絲膜菌Halorubrum sodomense兔子皮質(zhì)/腎上腺(CORT)

淺黃色假單胞菌Halorubrum coriense兔子皮質(zhì)(Cortisol)

釀酒酵母Burkholderia cepacia兔子皮質(zhì)(Cortisol)

云芝栓孔菌（變色栓菌）Brevundimonas diminuta兔子腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)

灰略紅鏈霉菌Burkholderia cepacia兔子腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)

黑附球菌Alkaliphilus transvaalensis兔子內(nèi)皮抑(ES)

腺苷環(huán)化激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體壁鹽單胞菌波茨坦沙門氏菌

玻璃粘連蛋白抗體杜搟氏菌慕尼黑沙門氏菌

血管內(nèi)皮生長因子B抗體海考克氏菌羅斯托克沙門氏菌

VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體克勞氏芽孢桿菌莫斯科沙門氏菌
多靶點(diǎn)激酶抑制劑（ENMD-2076 Tartrate）長野解支鏈淀粉芽孢桿 T4 RNA連接

Fusarium T7 DNA聚合

根霉 T7 RNA聚合

根瘤屬 T3 RNA聚合

黃桿 SP6 RNA聚合

長孢游動(dòng)雙孢 Pfu

陰溝腸桿 Taq plus

繩狀籃狀 Hotstart Taq

扣囊腹膜孢酵母 Hot Taq

哥倫比亞鏈霉 Taq

白布勒擔(dān)孢酵母 凝血

平田頭菇2-2 超氧化物歧化

枯草芽孢桿 氧化

微小根毛霉 氧化

季也蒙邁耶氏酵母 崩潰 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)