微管蛋白抑制劑(Mc-MMAE)

微管蛋白抑制劑(Mc-MMAE)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NAIF1 protein( CB12-327) 核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
卵巢癌抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
香栓孔菌Burkholderia gladioli兔子內(nèi)皮抑(ES)

擬蠶豆葡萄孢Achromobacter xylosoxidans兔子內(nèi)皮1(ET-1)

CarnobacteriumBurkholderia cepacia兔子內(nèi)皮1(ET-1)

突孢毛殼Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白G(IgG)

假單胞菌屬Achromobacter xylosoxidans兔子免疫球蛋白G(IgG)

沙福芽孢桿菌Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白E(IgE)

釀酒酵母Delftia acidovorans兔子免疫球蛋白E(IgE)

焦曲霉Ralstonia pickettii兔子免疫球蛋白A(IgA)

竹喙球菌Burkholderia cepacia兔子免疫球蛋白A(IgA)

盤長(zhǎng)孢狀盤孢Burkholderia gladioli兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

蘋果鏈格孢Burkholderia gladioli兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)

解淀粉芽胞桿菌Enterococcus faecium兔子可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

釀酒酵母Micrococcus luteus兔子可溶性間粘附分子1(sICAM-1)

泡盛曲霉Burkholderia cepacia兔子可溶性E選擇(sE-selectin)

動(dòng)物雙歧桿菌動(dòng)物亞種Paenibacillus polymyxa兔子可溶性E選擇(sE-selectin)

云微所奇異球菌Enterobacter aerogenes兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)

V5tag標(biāo)簽抗體氣單胞菌達(dá)累斯薩姆沙門氏菌

血管抑制蛋白1抗體伸長(zhǎng)鹽單胞菌（長(zhǎng)鹽單胞菌）伊斯特本沙門氏菌

囊泡乙酰通道抗體鞘盒菌（無法提供）浦那沙門氏菌

空泡分選蛋白18抗體玫瑰色微球菌翁德斯太浦沙門氏菌
微管蛋白抑制劑(Mc-MMAE)樟子松枯梢病 乙脫氫

紅外電熱滅器 乙脫氫

羊肚（不能訂購） 抗壞血酸氧化

大腸埃希 木聚糖

局限青霉 溶壁

 

Roseomonas 輔Q10

枯草芽孢桿 輔羧

糙皮側(cè)耳 還原輔Ⅱ四鈉鹽

毛榛畢赤酵母 氧化型輔Ⅱ二鈉

釀酒酵母 氧化型輔Ⅱ自由酸

擴(kuò)展青霉 還原輔Ⅰ抑制劑

平菇 還原輔Ⅰ二鈉鹽

米曲霉 氧化型輔Ⅰ

短芽孢桿 硫代氧化型輔I