腺苷受體拮抗劑和PDE抑制劑（Diphylline）

腺苷受體拮抗劑和PDE抑制劑（Diphylline）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-phosphor-LKB1(Ser428) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SAP-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗突觸素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibo

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

龍血竭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝25g

龍血A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazoleE3泛連接MUL1抗體包裝5g

龍芽楤木（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體包裝5g

龍眼肉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3-Quinuclidinone HCl肥大類糜蛋白1抗體包裝5MG

漏蘆(祁州漏蘆)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Irsogladine硝唑單克抗體包裝100g

蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： ADA monosodium salt線粒體核糖體蛋白L12抗體包裝25g

蘆根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADA disodium salt線粒體核糖體蛋白L39包裝1g

蘆薈(好望角蘆薈)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADA脫氫激1抗體包裝250mg

蘆薈大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine絲裂原活化的蛋白激p38β抗體包裝5g

蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Prednisolone phosphate sodium核基質(zhì)蛋白3抗體包裝1g

蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DMT-CL組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝5g

蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體包裝1g

蘆筍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Chloroguanosine轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體包裝250mg

蘆竹根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ITP•Na3NADH復(fù)合體5抗體包裝5g

蘆竹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： GTP.Na2肌微管1抗體包裝1g

: AS3.4357資源名稱: 納地青霉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR抗磷脂酰膽堿抗體試劑盒沒食子兒茶;Gallocatechin

阿魏側(cè)耳Pleurotus│fuscus var. ferulae Lanzi 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)抗磷脂酰膽堿抗體試劑盒二乙烯苷;tetrahydroxyl

柄孢殼菌Podospora│cochleariformis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR抗磷壁抗體試劑盒二氫麻醉椒苫 ;dihydrometh
腺苷受體拮抗劑和PDE抑制劑（Diphylline）整合alpha E2抗原鹽羅通定（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

巨噬表面分子抗原鹽洛美沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌因同源物A抗原鹽馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

黑色瘤相關(guān)鹽馬普替林（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

絲裂原活化蛋白激激1抗原鹽嗎啉胍（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗原鹽美金剛（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

抑癌因抗原鹽美利曲辛（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

蛋白裂解（一種新的癌因）抗原鹽美司坦（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

人巨病UL49抗原鹽美西律（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat