HCV NS5B聚合酶抑制劑（VCH-916）

HCV NS5B聚合酶抑制劑（VCH-916）公司*的產(chǎn)品：Anti-NF-L/PE 熒光素PE標(biāo)記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-VSV-G tag/FITC 熒光素標(biāo)記VSV-G tag標(biāo)簽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
p53凋亡刺激蛋白1抗體 anti-ASPP1 0.1m

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：HCV NS5B聚合酶抑制劑（VCH-916）

英文名稱：VCH-916

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： ADP.Li3髓性白血病蛋白1抗體包裝1g

鹿角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Erythritol磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝25g

鹿茸（馬鹿）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADP.Ba組織相容性復(fù)合體2抗體包裝5g

鹿茸（梅花鹿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADP.K磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝25g

鹿銜草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IDP.Na2基化CpG結(jié)合蛋白2抗體包裝5g

路邊青（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADP.Na磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝1g

路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-(+)-CellobioseNADH復(fù)合體6抗體包裝25g

路路通（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytidine-5'-diphosphate disodium salt黑色瘤相關(guān)抗原11抗體包裝5g

綠包藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cytidine-5'-monophosphate Disodium Salt同源盒基因Msx2抗體包裝100ml

綠茶（茶葉）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： TFA-aa-U磷化絲/蘇蛋白激MARK4抗體包裝25ml

綠萍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： TFA-aa-dU膜型基質(zhì)金屬蛋白胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

綠絨蒿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Iodo-Uridine周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體包裝25g

綠原(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Iodo-deoxyuridine自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體包裝5g

化兩面針堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Iodo-deoxycytidine有絲分裂周期蛋白MPP9抗體包裝1g

化木蘭花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2’-OMe Uridine減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝25g

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：USP抗鏈球菌溶血O抗體試劑盒二氫醉椒;dihydrokavain

產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR抗鏈球菌溶血O抗體試劑盒二氫小檗堿;Dihydroberberi

日本慢生根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分抗鏈激試劑盒二十八烷;Octacosyl alco
HCV NS5B聚合酶抑制劑（VCH-916）整合α3抗體蟲草(標(biāo)準(zhǔn)品) ZSTK474；ZSTK-474

整合β5抗體臭靈丹（標(biāo)準(zhǔn)品） Luteolin 7-O-glucuronide

整合α1抗體臭梧桐葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Ganetespib

白介2受體β鏈抗體 IL-2Rβ川貝母（標(biāo)準(zhǔn)品） Lucidenic acid D

干擾α2b抗體川陳皮(標(biāo)準(zhǔn)品) DAPT (GSI-IX)

誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體川燈心草（標(biāo)準(zhǔn)品） Lucidenic acid E

雞傳染性法氏囊病病抗體川楝(標(biāo)準(zhǔn)品） Licofelone

白介-17抗體川楝子（標(biāo)準(zhǔn)品） Ganoderenic acid C

5'肌苷磷脫氫2抗體川麥冬苷A Biocytin 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)