Pim-1抑制劑(Hispidulin)

Pim-1抑制劑(Hispidulin)公司*的產(chǎn)品：Anti-SCN2A/FITC 熒光素標記電壓閥門鈉通道蛋白a2/癲癇相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADM (Adrenomedullin)(22-52) 腎上腺髓質素(22-52)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1mg
髓過氧化物酶抗體 Anti-MPO 0.1

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Pim-1抑制劑(Hispidulin)

英文名稱：Hispidulin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

單色革蓋菌Sporobolomyces roseus

肝色牛排菌Sporobolomyces roseus

枯草芽孢桿菌深黑變種Saccharomyces exiguus

黑曲霉Saccharomyces exiguus

帚石南棒桿菌Trichosporon brassicae

芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌Rhodotorula rubra

毛栓菌Candida tropicalis

米曲霉Candida tropicalis

富養(yǎng)羅爾斯通氏菌Candida boidinii

平菇(紅平)Candida boidinii

參子凸臍蠕孢Candida boidinii

紅曲霉Candida boidinii

銅綠假單胞菌Trichosporon cutaneum

黃曲霉Trichosporon cutaneum

金黃殼囊孢Candida utilis

小鼠膠質系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒白血病相關蛋白AHI1抗體人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP) 馬錢苷

小鼠膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒活化誘導胞嘧啶核苷脫抗體人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP) 買麻藤

小鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒三磷腺苷結合盒轉運蛋白9抗體人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷

小鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒ADP核糖基化因子3抗體人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE) 麥冬甲基黃烷A
Pim-1抑制劑(Hispidulin)Smoothened 英文名稱： 跨膜蛋白Smoothened抗體 0.1ml

Epiphycan 英文名稱： 軟骨素蛋白多糖3抗體 0.2ml

CASPASE3凋亡抑制劑 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml

Anti-TTF-1/FITC 熒光素標記甲狀腺核轉錄因子-1/甲狀腺特異增強子結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體 規(guī)格 0.1ml

Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg